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分泌型熒光素酶試劑盒解決方案

瀏覽次數:1345 發布日期:2019-12-17  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負


作為報告基因,熒光蛋白(如綠色熒光蛋白(GFP)及其變體紅色熒光蛋白(RFP)和黃色熒光蛋白(YFP)或者生物熒光素酶(如螢火蟲熒光素酶(Firefly luciferase,Fluc)海參熒光素酶(Renilla luciferase,Rluc))已成為研究基因調控、抗癌藥物活性考察、基因突變分析、生物成像、DNA雜交分析及實時監測腫瘤發生發展情況等生物過程的潛在有效分析工具。但GFP等熒光蛋白的靈敏性相比于熒光素酶要低很多,而且GFP在細胞內容易累積,使其不適合實時監測。現有的生物熒光素酶中,Fluc發光時需要輔助因子ATP和Mg2+,Rluc雖然不依賴于ATP和Mg2+等輔助因子,但光子產量較低,另外Fluc和Rluc均不能分泌表達,監測酶活性時需要裂解細胞,操作繁瑣且不能實現對實驗現象的連續觀察。

近年,發現的一種來源于海洋橈腳類動物Gaussia princeps的Gaussia 分泌型熒光素酶是體內已知最小的可自然分泌的熒光素酶。因其可分泌、易于監測、靈敏度過、半衰期短、可進行活細胞或生物體實時監測等特性,在研究蛋白質-蛋白質相互作用、蛋白定位、小干擾RNA(siRNA)沉默技術、腫瘤模型藥物治療評價、監測啟動子活性、實時監測腫瘤發生發展情況和高通量藥物篩選等中得到廣泛應用。通過報告基因載體,Gaussia可用于哺乳動物細胞表達。表達后的Gaussia為單條肽鏈的單體酶,其分子較小(185aa),且具有分泌性信號肽,因此可通過內質網分泌到細胞外。該熒光素梅催化底物腔腸素的氧化反應并且發光(480nm),該反應無需ATP參與。

與其他熒光素酶相比,使用Gaussia 作為報告基因有更多的優勢:

  1. 分泌型熒光素酶,可直接取上清檢測,無須裂解細胞;
  2. 發光強度高,是其它熒光素酶的1千倍;
  3. 反應無須ATP,不受ATP影響;
  4. 穩定性高,對溫度、PH值等耐受性強。

分泌型堿性磷酸酶(secreted alkaline phos-phatase,SEAP)是人胎盤堿性磷酸酶的突變體,最大特點是能由表達細胞分泌到細胞外,檢測時可在不破壞細胞的情況下,任意時間點取細胞培養上清液進行重復、動態的檢測,常作為熒光素酶檢測過程中信號標準化的內參。

GeneCopoeia 提供預制和定制的 GLuc-ON™ 啟動子克隆,包括單報告基因載體系統和雙報告基因載體系統。單報告基因載體系統以 Gluc 作為啟動子的報告基因;雙報告基因載體系統以 Gluc 作為啟動子報告基因,以SEAP作為信號標準化的內參,可在活細胞中對超過 20,000 種人和 18,000 種小鼠啟動子進行實時活性分析。

分泌型雙熒光素酶檢測試劑盒

Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit用于檢測雙報告系統中 Gluc 和SEAP的活性。Gluc 和SEAP都是分泌型蛋白,無需裂解細胞就能從培養基中獲得實驗樣本。

貨號 名稱 規格 產品特性
LF031 Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit 100rxns 無需破碎細胞,吸取上清;檢測Gluc 和SEAP酶活性
LF032 300rxns

分泌型單熒光素酶檢測試劑盒

貨號 名稱 規格 產品特性
LF061 Secrete-PairTM Gaussia Luciferase Assay Kit 100rxns 無需破碎細胞,吸取上清;檢測Gluc的酶活性
LF062 1000rxns

熒光素酶報告基因載體:

貨號 產品 描述 規格
ZX101 pEZX-GN01 pEZX-GN01 包含Gluc和SEAP的報告載體 10µg
ZX102 pEZX-GN03 pEZX-GN03 包含Gluc和SEAP的報告載體 10µg
ZX103 pEZX-GA01 pEZX-GA01 包含Gluc和SEAP的報告載體 10µg
ZX104 pEZX-GA02 pEZX-GA02 包含Gluc和SEAP的報告載體 10µg
ZX105 pEZX-GA03 pEZX-GA03 包含Gluc和SEAP的報告載體 10µg
ZX106 pEZX-LvGN01 pEZX-LvGN01 包含Gluc和SEAP的報告載體 (lentiviral) 10µg
ZX107 pEZX-LvGA01 pEZX-LvGA01 包含Gluc和SEAP的報告載體 (lentiviral) 10µg

GeneCopoeia致力于為國內生命科學工作者提供一流的產品和及時周到的服務,通過豐富的基因、蛋白、抗體、分析試劑盒等產品線,加速您的研究進程。作為GeneCopoeia在中國的區域一級代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的GeneCopoeia產品以及客戶訂制化服務。

作為GeneCopoeia在中國的區域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的GeneCopoeia公司產品以及客戶訂制化服務。

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聯系電話:400-6800-868 027-59626688
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