一．操作步驟

 1.   用美工刀切割試劑單孔，先縱向割開一條(8個)，再橫向割一個或兩個、三個……(沿兩孔之間縫隙割)。

 2.   取出割好的檢測單孔，做好相應樣品標記(可以在側面用細水筆標記數字)，揭開密封鋁箔。

 3.   使用取樣槍按樣品順序吸取各樣品(50μl)，加到相應單孔中。注意：每個取樣頭對應一個樣品，用過的取樣頭扔掉。

   4．全部樣品添加完畢后，剪取相應密封條對檢測單孔進行密封。(密封條已經對應單條截好，只需用手撕取，檢測量不到一條8個的，再對應用剪刀剪取)。

   5．將密封后的檢測單孔放入水浴鍋或者恒溫培養器內進行培養，培養時間2小時30分鐘左右。

 6．取出培養后的檢測，從側面觀測單孔顏色，記錄檢測結果。

            注：結果判讀

                黃色到淺黃綠色包括綠色為陰性結果范圍  

                藍綠色到紫色為陽性結果范圍   

   7.為了保證每次檢測的準確性以及找到錯誤結果的原因，每次檢測建議做一個陰性對照(用無抗奶作為陰性對照)，如果有條件同時也可以做一個陽性對照(10ppb的青霉素樣品作為陽性對照，為了確保試劑是否正常)。

二．試劑保存

   1．保存溫度： 4-12℃ (一般冰箱的保鮮柜即可滿足保存條件)

   2．避光保存：本產品對陽光敏感，一般不要長時間暴露在陽光下，或者燈光下。

      注：試劑不可冷凍保存，經過冷凍的試劑內部成分將被破壞；試劑及樣品要恢復到室溫后才可開始檢測操作，但是需要把剩余的檢測小孔馬上放回冰箱，以免重復多次后影響試劑的性能。

三． 注意點

  1．培養的工具，可以使用恒溫水浴鍋，或者生化培養箱，溫度必須嚴格控制在65℃±1℃，超過此溫度條件，檢測結果會受到影響，嚴重的就會有假陽性和假陰性結果出現。

2.每板未使用完的試劑一定要馬上要放回盒子里面，并在冰箱保存，注意要用原來的塑料袋繼續封好。另外不要把已經撕開的小孔或者不小心弄破鋁薄紙的小孔繼續放回冰箱待用，如果不小心弄破小孔后要用粘膠紙封好，并且在最快時間內使用完。

3.在使用恒溫水浴鍋時，把加好樣品后的檢測小孔用配備的粘膠紙密封完全，以避免因為受熱而進水。另外，把試劑孔放在框板里面，然后慢慢地放入水浴鍋內，使之漂浮在水面上。不要把框板整個放入水面以下，這樣會使膠紙粘性失效或者降低，使水氣或者水進入小孔內，使檢測結果發生偏差。

4.加樣槍的使用，加樣槍有兩個檔位，以第一個為準，輕輕往下按直到需要用較大力往下按為止，這個為一檔。要求一擋吸取牛奶樣品，二檔添加牛奶樣品，這樣保證加樣量達到50ul。50ul的容量大概是牛奶樣品占用了大概2mm左右的高度，或者大概是2滴半加樣槍的量，如果超過這個高度，很可能是加樣槍使用錯誤或者加樣槍已經不準確。

5.定期要對水浴鍋的溫度進行測量(最好連續觀察30分鐘，確定溫度是否還能在正常工作范圍內)，以保證實驗的準確性。如果用恒溫培養箱做也需要做溫度的確認，不能超過規定范圍。專用的FX加熱器不需要做溫度確認。

6.剛擠下來的牛奶不能直接檢測，需要把牛奶先放在冰箱冷藏室1-2個小時后再開始檢測，剛擠下的熱牛奶含有很多的抑制微生物的成分，影響檢測結果出現假陽性。

7．樣品的PH值要求是和原料奶的PH值一樣，即6.6左右。如果PH值過高或過低都可能引起錯誤的結果，PH值過高則導致假陽性結果，PH值過低則導致假陰性結果。所以在每次檢測之前先測一下樣品的PH值。

8.如果加樣后，牛奶樣滲透到小孔底部(底部厚厚的一層白色)或者這個小孔側面都有白色的奶樣，證明試劑曾經經歷過非常低溫度狀態(2℃以下的溫度)，對于這種檢測小孔建議再做一次檢測來確認結果。

ECLIPSE50簡稱E50，是由西班牙引入中國的，并作為國標第二法被納入乳品的法規。根據以前法規很難或者很長時間才改變的事實，從而可以認定它必將是個長期執行的法規。E50使用的是微生物抑制法，試劑中的桿菌是在65.0℃生長最快的，其他溫度都會降低桿菌的生長速度，如果實驗者使用了溫度不能恒定的水浴鍋和培養箱，從而導致客戶在最佳培養時間時不能判讀結果。