1、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

• 棄去培養(yǎng)瓶中上清液，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
• 加 1-2ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2

分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加 6ml 完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落、吹散。

• 吹打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 5 分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
• 將細(xì)胞懸液按 1：2 到 1：4 的比例分到新的含 6ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

2、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM 條件下離心 5 分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按 1：2 到 1：5 的比例分到新的含 6ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按 1：2到 1：3 的比例分到新的含 6ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000RPM 條件下離心 5 分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及 DMSO，凍存比例為 90%FBS+10%DMSO。

特別注意：

• 收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含 10% FBS 的新鮮培養(yǎng)基，不建議使用原瓶中運(yùn)輸用培養(yǎng)基。
• 如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)拍照并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
• 細(xì)胞任何售后問題，均需拍照存檔并及時(shí)聯(lián)系客服。