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病毒包裝技術(shù)1——病毒與非病毒載體介紹

瀏覽次數(shù):1438 發(fā)布日期:2015-6-24  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
銳賽小課堂0617-106

基于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的研究理念,銳賽知道,每一項臨床疾病的致病源頭或表象最初都是由個體體內(nèi)某個基因的突變導(dǎo)致了。所以每一項臨床疾病的研究,整體課題項目開展的最初源頭也必須從一個基因開始。
銳賽在多年的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中,在于各個臨床醫(yī)師的整體項目合作中,探討得出的不僅是轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)臨床研究課題的整體思路,一般實驗方向,更有各個環(huán)節(jié)單項具體實驗的操作紀(jì)要。
現(xiàn)將整體實驗的一般實驗方案,各單項技術(shù)的實驗方法在此分享給大家,不僅是為了大家實驗室的需要更是為了進(jìn)一步提高轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的效率,為病患之需而行。

對于整體項目的一般實驗思路:
基因-基因化學(xué)合成/調(diào)取-載體構(gòu)建-病毒包裝-穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建-細(xì)胞功能實驗-動物實驗/臨床樣本分析-數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計,研究

病毒包裝技術(shù)1——病毒與非病毒載體


病毒載體的優(yōu)勢

特點

病毒載體來源于對病毒基因組進(jìn)行操作和改造,消除致病性基因,保留其感染活性,使之成為具有生物活性的基因載體。使它攜帶上外源基因被包裝成病毒顆粒就構(gòu)成了基因?qū)胂到y(tǒng) (gene delivery system)。


由于病毒的多樣性及與機體復(fù)雜的依存關(guān)系,人們至今對許多病毒的生活周期、分子生物學(xué)、與疾病發(fā)生及發(fā)展的關(guān)系等的認(rèn)識還很不全面
對其進(jìn)行改造在技術(shù)上有很大的局限,使不是所有病毒種類都能被改造、消除其致病性用于人體近20年,幾種病毒如反轉(zhuǎn)錄病毒(包括HIV 病毒)、腺病毒、腺病毒伴隨病毒、皰疹病毒(包括單純皰疹病毒、痘苗病毒及EB病毒)被成功地改造成為基因轉(zhuǎn)移載體并開展了不同程度的應(yīng)用。但是分子病毒學(xué)和生物技術(shù)手段的發(fā)展將反向遺傳學(xué)方法應(yīng)用到病毒載體構(gòu)建,使RNA病毒如Sindbis病毒、流感病毒、仙臺病毒等被成功地改造成病毒載體。
用于基因?qū)氩⒛茉谂R床開展研究的病毒載體一般特點有

(1)攜帶外源基因并能包裝成病毒顆粒;

(2)能感染目的細(xì)胞并介導(dǎo)基因表達(dá)

(3)對人體不致病并不能在一般環(huán)境中傳播、增殖。

 

非病毒載體

非病毒載體包括質(zhì)粒DNA反義寡核苷酸、Ribozyme、siRNA 等。常用與組成非病毒載體導(dǎo)入系統(tǒng)的物質(zhì)包括脂類、多糖、多肽或蛋白質(zhì)、多聚組氨酸或多聚賴氨酸、多價陽離子化合物、類固醇等。用這些物質(zhì)不同的組合和配比來構(gòu)建能包裹于載體DNA或其它核酸物質(zhì),這類“人工外殼”模擬細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)成分構(gòu)成脂質(zhì)體骨架。常見的成分有脂質(zhì)體、殼聚糖、多價陽離子聚合物如PEI、多聚賴氨酸或組氨酸多聚陽離子化合物。同時加上靶向性多肽毒來源的多肽細(xì)胞膜融合流感病毒HA蛋白的一個肽段幫助載體靶向?qū)搿⑷诤稀?/SPAN>從內(nèi)吞體中釋放等功能但是目前非病毒載體導(dǎo)入系統(tǒng)在轉(zhuǎn)導(dǎo)效率、顆粒均一性、穩(wěn)定性等方面仍不理想,因此限制了其進(jìn)一步發(fā)展的空間
持續(xù)發(fā)布中......

參考鏈接:http://www.research-bio.com/h-col-159.html​
發(fā)布者:上海銳賽生物技術(shù)有限公司
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