主動靶向通過與靶細胞的受體特異性相互作用，依賴于靶向配體實現。這些配體包括小分子配體、碳水化合物、肽、抗體或適配體。根據這些配體的理化性質，可以使用兩種方法將它們與脂質納米顆粒結合：

一步法組裝是一種較為簡單和快速的方法，用于將所有結構脂質、輔助脂質和靶向配體一次性組裝成脂質納米顆粒。這種方法的主要優點是省去了多個步驟，可以大大縮短制備時間，同時也可以提高納米顆粒的穩定性和均一性。
 

在一步法組裝中，所有的原料包括結構脂質、輔助脂質和靶向配體將被混合在一起，形成一個混合物。然后，這個混合物會被加入到一定量的溶劑中，并采用適當的方法（如超聲波處理、攪拌等）將其納米化。最終，通過蒸發溶劑或其他方法，納米顆粒得以形成。
 

這種方法的實現需要注意一些關鍵因素，如混合物組分比例、納米化方法和納米顆粒的后續處理等。例如，選擇合適的溶劑和納米化方法可以控制納米顆粒的大小和分布，從而影響其藥物遞送性能。此外，靶向配體的濃度和結構也會影響靶向納米顆粒的靶向性和生物活性。
 

與其他制備方法相比，一步法組裝方法的優點在于制備過程簡單，不需要多個步驟，并且可以同時將所有成分引入納米顆粒中，從而提高了穩定性。然而，由于混合物組分比例和納米化方法的選擇會影響納米顆粒的性能，因此需要在制備過程中進行仔細控制和優化。

"后插入"預成型納米顆粒：首先，制備好預先形成的普通脂質納米顆粒。然后，將靶向配體后插入到這些納米顆粒中。這種方法通過將配體引入納米顆粒中來實現靶向作用，使得已經形成的納米顆粒具有靶向能力（圖b）。