細胞實驗中溶劑選擇的注意事項
■ 不到不得已，誰也不想現用現配
細胞實驗的工作濃度通常在 μM 級別，有的還是 nM 和 pM，要做到現用現配，難度系數有點高，好比讓一個日均不到 1000 步的人去爬 5000 米的山峰，這難度，你細品！一方面這個操作對天平的精度要求很高，誤差太大，再者，每一次稱量都會有損失，稱量的過程也難以做到無菌操作，當然，對于一些極不穩定的化合物，比如有極易氧化的特性的化合物，現用現配是剛需。
■ 不提比例就判定有毒，實在是不負責任的耍流氓行為
以 DMSO 為例，一般建議其終濃度在 0.1% 以下，這個濃度是非常保守的建議了，有一些細胞本身并不敏感，可以承受 0.5% 的 DMSO，甚至 1% 的 DMSO 對細胞活力也沒有明顯影響。不過呢，不管什么比例，記得要做好對照哦！
■ 凡事都有例外
正如前面所提到的，DMSO 固然可用于諸多化合物的溶解，但是面對含鉑化合物的時候，也是無能為力呢，這個時候，就需要 DMF 等輔助出場了。再比如辛伐他汀 (Simvastatin)，需要溶于乙醇、再用 NaOH 激活，才可進行實驗。
■ 溶解藥物，既要講“法理”，也要通“人情”
比如，GW4869 微溶于 DMSO，難溶于水，除了借力甲磺酸，也可用 DMSO 配置成均勻的混懸液作為儲備液，最后用培養基稀釋可達到澄清狀態；比如，天氣冷的時候，可先預熱 DMSO 母液和培養基，這樣稀釋后減少析出的可能性；比如配置/稀釋的過程中，如遇到析出情況，可借助超聲/加熱的方式輔助溶清；比如購買了大量粉末，瓶子不夠大，無法配置到相應濃度的時候，可分步溶解再轉移至大容器處理。
■ 不要隨便拒絕沒聽過的溶劑
THF、丙酮、乙腈、乙酸乙酯，這些溶劑不常見，卻是友好的存在，比如丙酮，在 MCF-7、RAW-264.7 以及 HUVEC 細胞系中，比 DMSO、乙醇和 DMF 都更加友好、毒性更小。再比如在 CV1-P 細胞系中，0.5% THF 對細胞活力也沒有明顯影響。
參考文獻
1. Shigeo Nagashima, Hiroaki Okamoto, et al. Hepatitis E virus egress depends on the exosomal pathway, with secretory exosomes derived from multivesicular bodies. J Gen Virol. 2014 Oct;95(Pt 10):2166-2175.
2. S Adler, S. Bremer, et al. The effects of solvents on embryonic stem cell differentiation. Toxicol In Vitro. 2006 Apr;20(3):265-71.
3. Leila Jamalzadeh, Hosein Ghafoori, et al. Cytotoxic Effects of Some Common Organic Solvents on MCF-7, RAW-264.7 and Human Umbilical Vein Endothelial Cells. Avicenna J Med Biochem. 2016 June; 4(1):e33453.
4. Orly Livny, Betty Schwartz, et al. Lycopene inhibits proliferation and enhances gap-junction communication of KB-1 human oral tumor cells. J Nutr. 2002 Dec;132(12):3754-9.
細胞實驗的工作濃度通常在 μM 級別，有的還是 nM 和 pM，要做到現用現配，難度系數有點高，好比讓一個日均不到 1000 步的人去爬 5000 米的山峰，這難度，你細品！一方面這個操作對天平的精度要求很高，誤差太大，再者，每一次稱量都會有損失，稱量的過程也難以做到無菌操作，當然，對于一些極不穩定的化合物，比如有極易氧化的特性的化合物，現用現配是剛需。
■ 不提比例就判定有毒，實在是不負責任的耍流氓行為
以 DMSO 為例，一般建議其終濃度在 0.1% 以下，這個濃度是非常保守的建議了，有一些細胞本身并不敏感，可以承受 0.5% 的 DMSO，甚至 1% 的 DMSO 對細胞活力也沒有明顯影響。不過呢，不管什么比例，記得要做好對照哦！
■ 凡事都有例外
正如前面所提到的，DMSO 固然可用于諸多化合物的溶解，但是面對含鉑化合物的時候，也是無能為力呢，這個時候，就需要 DMF 等輔助出場了。再比如辛伐他汀 (Simvastatin)，需要溶于乙醇、再用 NaOH 激活，才可進行實驗。
■ 溶解藥物，既要講“法理”，也要通“人情”
比如，GW4869 微溶于 DMSO，難溶于水，除了借力甲磺酸，也可用 DMSO 配置成均勻的混懸液作為儲備液，最后用培養基稀釋可達到澄清狀態；比如，天氣冷的時候，可先預熱 DMSO 母液和培養基，這樣稀釋后減少析出的可能性；比如配置/稀釋的過程中，如遇到析出情況，可借助超聲/加熱的方式輔助溶清；比如購買了大量粉末，瓶子不夠大，無法配置到相應濃度的時候，可分步溶解再轉移至大容器處理。
■ 不要隨便拒絕沒聽過的溶劑
THF、丙酮、乙腈、乙酸乙酯，這些溶劑不常見，卻是友好的存在，比如丙酮，在 MCF-7、RAW-264.7 以及 HUVEC 細胞系中，比 DMSO、乙醇和 DMF 都更加友好、毒性更小。再比如在 CV1-P 細胞系中，0.5% THF 對細胞活力也沒有明顯影響。
暴露于不同溶劑的 MCF-7、RAW-264.7 和 HUVEC 細胞的細胞存活率
參考文獻
1. Shigeo Nagashima, Hiroaki Okamoto, et al. Hepatitis E virus egress depends on the exosomal pathway, with secretory exosomes derived from multivesicular bodies. J Gen Virol. 2014 Oct;95(Pt 10):2166-2175.
2. S Adler, S. Bremer, et al. The effects of solvents on embryonic stem cell differentiation. Toxicol In Vitro. 2006 Apr;20(3):265-71.
3. Leila Jamalzadeh, Hosein Ghafoori, et al. Cytotoxic Effects of Some Common Organic Solvents on MCF-7, RAW-264.7 and Human Umbilical Vein Endothelial Cells. Avicenna J Med Biochem. 2016 June; 4(1):e33453.
4. Orly Livny, Betty Schwartz, et al. Lycopene inhibits proliferation and enhances gap-junction communication of KB-1 human oral tumor cells. J Nutr. 2002 Dec;132(12):3754-9.
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