細胞系的抗體滴度與產(chǎn)品的產(chǎn)量與生產(chǎn)成本息息相關，實踐證明提高瞬時轉染HEK293細胞系和CHO細胞系的表達滴度可以提高抗體產(chǎn)量，有效降低生產(chǎn)成本。

 

穩(wěn)定生產(chǎn)細胞系生產(chǎn)過程中，在可重復性和可放大性等多方面都具有許多優(yōu)勢。細胞的培養(yǎng)參數(shù)對細胞系的培育也具有較大的影響力。比如：溫度、pH、滲透壓、氣體流速、罐內壓力、攪拌罐內的攪拌槳類型、攪拌速度和細胞代謝物水平等。另外，在生物工藝技術中，細胞的密度、細胞活性、線粒體活性、LDH、NADH水平等生物因素，也會影響到蛋白質合成、PTM等從而波及到產(chǎn)物的產(chǎn)量及品質。

 

所以，優(yōu)化細胞系的抗體滴度，除了對宿主細胞系進行設計改造外，細胞的培養(yǎng)參數(shù)優(yōu)化設計，對于提升細胞表達滴度、滿足產(chǎn)品質量要求也很重要。

 

我們知道，在抗體產(chǎn)品的產(chǎn)量是通過工藝放大來實現(xiàn)，而生物工藝放大過程中又會受到很多因素的影響。比如生物因素和細胞培養(yǎng)參數(shù)等，生物反應器容量體積等。所以在放大工藝生產(chǎn)中的各個環(huán)節(jié)，都需要嚴格把控，此外還需要進一步強化技術培訓指導，是工藝生產(chǎn)操作規(guī)范化、標準化，從而確保細胞的生產(chǎn)力與產(chǎn)品質量的有效提升。

 

 

瞬時轉染細胞由于此類細胞構建生產(chǎn)細胞系比較耗時，而且難度也較大，故很少用于臨床或者商業(yè)規(guī)模化生產(chǎn)，比較適用于實驗室小規(guī)模試驗。在穩(wěn)定生產(chǎn)細胞系進行規(guī)模化工藝放大生產(chǎn)時，有時也會使用瞬時轉染細胞放大到批次或補料分批生物反應器工藝中，以快速提升產(chǎn)品產(chǎn)量加速生產(chǎn)過程。 目前，一些細胞生產(chǎn)廠商也在嘗試提高瞬時轉染HEK293細胞的表達滴度。比如：這種工藝技術用于蛋白質生產(chǎn)的轉染工藝和哺乳動物表達載體進行優(yōu)化，可使重組抗體的單位體積產(chǎn)量達到>0.5g/L。 國內細胞生產(chǎn)商開發(fā)的CHO細胞高滴度瞬轉表達系統(tǒng)具有高產(chǎn)量低成本等優(yōu)勢，已成為生產(chǎn)抗體類藥物廣泛應用的工程細胞，而CHO細胞瞬時轉染是新藥研發(fā)過程中必不可少的技術工藝。

從長遠看來，提高瞬時轉染HEK293細胞的抗體滴度 在基因治療領域也很有意義。瞬時轉染是雖是產(chǎn)生高質量載體的常用方法，但規(guī)模化放大生產(chǎn)仍然是基因制藥行業(yè)的一個重大挑戰(zhàn)。要想取得重大突破還需要更多的努力。在進行MDCK 細胞 、 HEK293細胞培養(yǎng), CHO懸浮細胞培養(yǎng)、貼壁細胞培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)、高抗體滴度瞬轉表達系統(tǒng)生產(chǎn)時也會面臨同樣的問題。