RF因子IgG抗體ELISA檢測試劑盒使用說明
瀏覽次數:222 發布日期:2024-10-12
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原理:
本試劑盒采用純化RF抗原預包被板ELISA原理,并配以酶標記抗人IgG(h+L)鏈單克隆抗體作為標記物。加入底物TMB顯色后終止反應,在450nm波長測各孔O.D值,O.D值的大小與待檢抗體含量成正比。試劑的特異性高、靈敏度好、穩定性極大地提高是本試劑含有的獨特優點。
用途:
本試劑盒用于定性檢測人血清/血漿/乳汁等標本中的RF因子IgG抗體。
試劑盒組成:
1、抗原預包被反應板 1塊(8X12/4X12)
2、陰性對照 1瓶(直接使用)
3、陽性對照 1瓶(直接使用)
4、標本稀釋液 1瓶(20/10 ml,直接使用)
5、酶結合物 1瓶(10/5ml,直接使用)
6、30X濃縮洗液 1瓶(20/10ml,加蒸餾水1:30稀釋使用)
7、顯示劑A、B液 各1瓶(5/2.5ml)
8、終止液(2M H2SO4) 1瓶(5/2.5ml)
9、說明書 1份
操作步驟:
1. 將試劑盒平衡至室溫后取出反應板拆封。
2. 加樣:每孔加標本稀釋液200ul,再分別加待檢標本5ul(1:41),設陰陽性對照(100ul各一孔)于反應板中,設空白對照一孔(加100ul標本稀釋液),輕拍混勻。
3. 37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體,用洗滌液連續洗板3次每次在吸水紙上拍干。
4. 加酶結合物:每孔2滴(或100ul),混勻后置37℃溫育30分鐘。同上法洗滌3次并拍干。
5. 顯色:每孔加顯色劑A、B各1滴(或50ul),輕拍混勻(或震蕩器混勻)后置37℃10分鐘。
結果判斷:
1. 目測:在白色背景下觀察各孔顯色情況,蘭色者為陽性,無色者為陰性。
2. 酶標儀測定:每孔加終止液1滴(或50ul),混勻后在450nm下測定各孔O.D值。
① P/N=標本O.D值/陰性對照O.D值。
② P/N≥2.1為陽性;
③ P/N∠2.1為陰性。
④ 陰性對照小于0.10時以0.10計。
⑤ 肉眼可見蘭色,但酶標儀測出OD值小于0.21者,為可疑標本,應擇日重復。
注意事項:
1. 微孔板須密封防潮,從冷藏環境中取出時,應置室溫平衡至潮氣盡干后方可開啟使用,余者封存置2-8℃。
2. 滴加試劑前應將液體翻轉數次混勻,滴加時保持瓶身垂直。
3. 洗滌時每孔均須加滿,防止孔內有游離酶不能洗凈。
4. 試劑置2-8℃存放,不能凍結,有效期10個月。
5. 避免用溶血、混濁或脂血標本。
6. 最好用新鮮標本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小時或-20℃凍存4周(樣本應避光)