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標(biāo)記定量和非標(biāo)記定量蛋白組學(xué)區(qū)別

瀏覽次數(shù):796 發(fā)布日期:2024-2-26  來源:百泰派克生物科技

標(biāo)記定量和非標(biāo)記定量是蛋白質(zhì)組學(xué)中的兩種主要的定量策略,用于比較不同樣本或處理條件下的蛋白質(zhì)豐度。

以下是它們之間的主要區(qū)別:

 

1、標(biāo)記定量:

 

在樣品前處理階段,使用某種標(biāo)記技術(shù)對蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)酶解肽段進(jìn)行化學(xué)標(biāo)記,這些標(biāo)記通常具有不同的質(zhì)量。經(jīng)過混合后,通過質(zhì)譜儀分析,可以基于這些質(zhì)量差異來定量不同樣本中的蛋白。

圖1. 使用10plex TMT進(jìn)行相對定量的流程(Zhang et al.,2017)

2、非標(biāo)記定量:

 

不使用任何化學(xué)標(biāo)記,而是通過多次重復(fù)實驗,對同一蛋白在不同樣本中的信號強(qiáng)度(如肽段的峰面積或峰高)進(jìn)行比較來實現(xiàn)定量。

圖2. Label Free定量蛋白組學(xué)的流程

標(biāo)記定量方法在樣品前處理階段使用某種標(biāo)記技術(shù)對蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)酶解肽段進(jìn)行化學(xué)標(biāo)記,如ICAT、iTRAQ或TMT。這些標(biāo)記通常具有不同的質(zhì)量,使得經(jīng)過混合后的樣品可以通過質(zhì)譜儀的質(zhì)量差異來進(jìn)行定量。這種方法的優(yōu)勢是可以在質(zhì)譜分析之前混合樣本,從而減少由于實驗操作或機(jī)器分析帶來的變異,但缺點是需要額外的步驟進(jìn)行標(biāo)記,可能增加實驗成本和復(fù)雜性。

另一方面,非標(biāo)記定量方法不使用任何化學(xué)標(biāo)記,而是通過比較同一蛋白在不同樣本中的信號強(qiáng)度,如肽段的峰面積或峰高,來實現(xiàn)定量。這種方法在操作上更為簡單,不需要額外的標(biāo)記步驟,從而降低了成本。但為了確保實驗間的可比性,它需要更嚴(yán)格的樣品處理和質(zhì)譜分析條件。

發(fā)布者:北京百泰派克生物科技有限公司
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