什么是單克隆抗體？
單克隆抗體定義：與靶抗原上的特定表位結合的一種（單一）抗體構成單克隆抗體。

單克隆抗體生產
為了產生單克隆抗體，是將免疫原注射到宿主動物中。一旦免疫原引起免疫反應，脾臟中的 B 細胞就會被提取出來并與骨髓瘤細胞（癌細胞 B 細胞）融合。
健康的脾細胞不會在細胞培養中無限期地存活，因此進行此融合過程以制造永生細胞系。通過該過程產生雜交瘤細胞系。
通過將脾臟中的單個 B 細胞融合并培養到它們自己的雜交瘤中，產生了所有產生相同特異性抗體的 B 細胞的單一培養物。
B 細胞將單克隆抗體分泌到細胞培養基中。在這里，它們被提取出來進行進一步的測試和純化。
單克隆抗體雜交瘤克隆的產生提供了穩定的可再生抗體來源，確保每批與前一批相同。
為了產生一種分泌富含抗體的液體（稱為腹水）的腫瘤，也可以將雜交瘤注射到小鼠的腹腔中。

單克隆抗體的用途：

• 檢測特定抗原
• 檢測蛋白質家族的單個成員
• 在實驗/批次之間創建一致的結果
• 對背景較少的細胞進行染色——非常適合免疫組織化學、免疫細胞化學和免疫熒光實驗
• 量化蛋白質表達（例如流式細胞術或熒光激活細胞分選）
• 檢測分子構象的變化
• 檢測磷酸化狀態的變化
• 檢測 X 射線晶體學的目標
• 創建缺少特定細胞類型的動物模型
• 免疫療法

單克隆抗體不適用于：

• 基于同源性檢測跨物種的靶蛋白
• 檢測低水平的目標蛋白
• 檢測構象改變的蛋白質

 

多克隆	單克隆
具有不同抗原互補位的異質抗體群	具有一個互補位的特異性抗體的同源群體
非表位特異性	表位特異性
與相似抗原發生交叉反應的可能性增加	低交叉反應性
背景噪音的可能性增加	低背景噪音
批次變異性	相同的批次
開發成本低	開發成本高
快速生產（約 3 個月）	生產緩慢（約 6 個月）
許多宿主物種選擇	很少有宿主物種選擇

什么是多克隆抗體？
多克隆抗體定義：與靶抗原上許多不同表位結合的許多（多）不同抗體構成多克隆抗體。

多克隆抗體生產
將免疫原注射到宿主動物體內以產生多克隆抗體。動物中的免疫反應是由這種免疫原激活多個 B 細胞引起的，所有這些 B 細胞都針對免疫原上的特定表位。
大量具有不同互補位的抗體由此產生，因此對靶蛋白的親和力不同。
免疫后，可以直接從血清（去除凝血蛋白和紅細胞的血液）中使用這些多克隆抗體，或者將它們純化以獲得不含其他血清蛋白的溶液。
必須用抗原對新動物進行免疫以創建新批次，這意味著批次之間存在高度的可變性。

多克隆抗體的用途：

• 檢測具有高抗原同源性的已知或未知抗原亞型
• 檢測低水平的特定抗原
• 盡可能多地捕獲抗原（例如免疫沉淀或染色質免疫沉淀）
• 檢測變性蛋白質
• 檢測具有可能的遺傳多態性、糖基化或構象變化的靶標
• 跨多種檢測類型檢測天然蛋白質
• 在不同 pH 值和鹽濃度的溶液中檢測目標

多克隆抗體不適用于以下領域：

• 定量實驗，例如流式細胞儀，由于多個結合位點導致信號放大，會導致不正確的結果
• 與高同源蛋白存在交叉反應問題的情況

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