來自噬菌體的驚喜--- M13 Antibody (HRP)
前言
2018年10月諾貝爾化學獎的一半頒發給了美國科學家George P. Smith和英國科學家Gregory P. Winter, 兩人獲獎的原因是多肽和抗體的噬菌體展示技術。噬菌體展示技術在生物醫藥研發中有著十分廣泛的應用，是生物新藥研發的源頭技術，M13噬菌體則被廣泛地應用于噬菌體展示技術。M13的酶標抗體,是在噬菌體展示技術篩選結果ELISA檢測中不可缺少的試劑。
M13噬菌體
M13噬菌體是一種絲狀噬菌體，內有一個環狀單鏈DNA分子，長6407個核苷酸，含DNA復制和噬菌體增殖所需的遺傳信息。M13 DNA的復制起始位點定位在基因間隔區內。但是基因間隔區的有些核苷酸序列即使發生突變、缺失或插入外源DNA片段，也不會影響M13 DNA的復制，這為M13 DNA構建克隆載體提供了條件。
M13 噬菌體顆粒是絲狀的，只感染F+（含F質粒，能產生性菌毛）的大腸桿菌。感染宿主后通常不裂解宿主細胞，而是從感染的細胞中分泌出噬菌體顆粒，宿主細胞仍能繼續生長和分裂。但生長水平比未感染組低。
單鏈 DNA 的酶切和連接是比較困難的，因此 M13 噬菌體在用作載體時是利用其雙鏈 RF DNA。RF DNA 很容易從感染細胞中純化出來，可以象質粒一樣進行操作，并可通過轉化方法再次導入細胞。
在 M13 噬菌體基因組中絕大多數為必需基因，只有兩個間隔區可用來插入外源 DNA（基因 Ⅱ/Ⅳ 和基因 Ⅷ/Ⅲ 之間）。基因 Ⅱ 和基因 Ⅳ 之間的 508bp 間隔區是主要的外源片段插入位點。在基因 Ⅷ 和基因 Ⅲ 之間的小間隔區也可用來插入外源片段，但是在操作過程中，需要獲得感染細胞的菌落進行影印篩選，比利用可見的噬菌斑方法更慢更麻煩。基因 Ⅹ 也可用來克隆外源片段。
M13噬菌體展示系統
M13噬菌體屬于單鏈環狀DNA病毒，其基因組為6.4 kb，編碼10種蛋白，其中5種為結構蛋白，包括主要衣殼蛋白的PⅧ 和次要衣殼的pⅢ 、pⅥ 、PⅦ 和PⅨ 。其中，pⅢ 和PⅧ 是噬菌體展示中最常用的兩種蛋白，構建了pⅢ 和PⅧ 展示系統。pⅢ 蛋白分子量為42 kDa，分布在噬菌體顆粒的一端。一般一個噬菌體有3-5個拷貝的pⅢ 蛋白，可在N端的柔性連接區插入外源蛋白或者多肽。pⅢ 系統的主要優點是對展示的外源蛋白大小無嚴格的要求，該系統可以用來展示分子量較大的蛋白。PⅧ 蛋白的分子量為5.2 kDa，主要分布在噬菌體顆粒的兩側。由于該蛋白的分子量很小，只適合用來展示外源短肽。外源肽段的太大會影響病毒包裝，不能形成有功能的噬菌體。但由于pⅢ蛋白拷貝數較多，該系統比較適合用來篩選低親和力的配體。
M13酶標抗體
華安生物專注于抗體的研發與生產，擁有噬菌體展示技術抗體開發平臺，深刻了解M13酶標抗體對噬菌體展示技術的重要性。我們也一直在研發更加優秀的酶標抗體，現在就讓我們來了解華安生物最新M13酶標抗體吧。
實驗驗證：
Fig1: Elisa Test of M13 antibody (HRP)（EM1902-19） Binding to M13 Phage.
Samples were blocked with 1% BSA for 1 hours at 37°C and incubated with the primary antibody (EM1902-19, 1/10000) for 1 hours at 25°C. The M13 antibody was repeatedly frozen and thawed for 4 times at -80°C, 4°C, 37°C,.
Fig1: Elisa Test of M13 antibody (HRP) （EM1902-18） Binding to M13 Phage.
Samples were blocked with 1% BSA for 1 hours at 37°C and incubated with the primary antibody (EM1902-18, 1/10000) for 1 hours at 25°C. The M13 antibody was repeatedly frozen and thawed for 4 times at -80°C, 4°C, 37°C,.
2018年10月諾貝爾化學獎的一半頒發給了美國科學家George P. Smith和英國科學家Gregory P. Winter, 兩人獲獎的原因是多肽和抗體的噬菌體展示技術。噬菌體展示技術在生物醫藥研發中有著十分廣泛的應用，是生物新藥研發的源頭技術，M13噬菌體則被廣泛地應用于噬菌體展示技術。M13的酶標抗體,是在噬菌體展示技術篩選結果ELISA檢測中不可缺少的試劑。
M13噬菌體
M13噬菌體是一種絲狀噬菌體，內有一個環狀單鏈DNA分子，長6407個核苷酸，含DNA復制和噬菌體增殖所需的遺傳信息。M13 DNA的復制起始位點定位在基因間隔區內。但是基因間隔區的有些核苷酸序列即使發生突變、缺失或插入外源DNA片段，也不會影響M13 DNA的復制，這為M13 DNA構建克隆載體提供了條件。
噬菌體結構
M13 噬菌體的生物學特性M13 噬菌體顆粒是絲狀的，只感染F+（含F質粒，能產生性菌毛）的大腸桿菌。感染宿主后通常不裂解宿主細胞，而是從感染的細胞中分泌出噬菌體顆粒，宿主細胞仍能繼續生長和分裂。但生長水平比未感染組低。
噬菌體侵染細菌的過程
M13噬菌體載體單鏈 DNA 的酶切和連接是比較困難的，因此 M13 噬菌體在用作載體時是利用其雙鏈 RF DNA。RF DNA 很容易從感染細胞中純化出來，可以象質粒一樣進行操作，并可通過轉化方法再次導入細胞。
在 M13 噬菌體基因組中絕大多數為必需基因，只有兩個間隔區可用來插入外源 DNA（基因 Ⅱ/Ⅳ 和基因 Ⅷ/Ⅲ 之間）。基因 Ⅱ 和基因 Ⅳ 之間的 508bp 間隔區是主要的外源片段插入位點。在基因 Ⅷ 和基因 Ⅲ 之間的小間隔區也可用來插入外源片段，但是在操作過程中，需要獲得感染細胞的菌落進行影印篩選，比利用可見的噬菌斑方法更慢更麻煩。基因 Ⅹ 也可用來克隆外源片段。
噬菌體載體結構
M13噬菌體展示系統
M13噬菌體屬于單鏈環狀DNA病毒，其基因組為6.4 kb，編碼10種蛋白，其中5種為結構蛋白，包括主要衣殼蛋白的PⅧ 和次要衣殼的pⅢ 、pⅥ 、PⅦ 和PⅨ 。其中，pⅢ 和PⅧ 是噬菌體展示中最常用的兩種蛋白，構建了pⅢ 和PⅧ 展示系統。pⅢ 蛋白分子量為42 kDa，分布在噬菌體顆粒的一端。一般一個噬菌體有3-5個拷貝的pⅢ 蛋白，可在N端的柔性連接區插入外源蛋白或者多肽。pⅢ 系統的主要優點是對展示的外源蛋白大小無嚴格的要求，該系統可以用來展示分子量較大的蛋白。PⅧ 蛋白的分子量為5.2 kDa，主要分布在噬菌體顆粒的兩側。由于該蛋白的分子量很小，只適合用來展示外源短肽。外源肽段的太大會影響病毒包裝，不能形成有功能的噬菌體。但由于pⅢ蛋白拷貝數較多，該系統比較適合用來篩選低親和力的配體。
華安生物專注于抗體的研發與生產，擁有噬菌體展示技術抗體開發平臺，深刻了解M13酶標抗體對噬菌體展示技術的重要性。我們也一直在研發更加優秀的酶標抗體，現在就讓我們來了解華安生物最新M13酶標抗體吧。
| Product Name | Code Number | Product Type |
| Anti-M13（HRP） Antibody | EM1902-18 | Mouse monoclonal antibody |
| Anti-M13（HRP） Antibody | EM1902-19 | Mouse monoclonal antibody |
實驗驗證：
Samples were blocked with 1% BSA for 1 hours at 37°C and incubated with the primary antibody (EM1902-19, 1/10000) for 1 hours at 25°C. The M13 antibody was repeatedly frozen and thawed for 4 times at -80°C, 4°C, 37°C,.
Samples were blocked with 1% BSA for 1 hours at 37°C and incubated with the primary antibody (EM1902-18, 1/10000) for 1 hours at 25°C. The M13 antibody was repeatedly frozen and thawed for 4 times at -80°C, 4°C, 37°C,.
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