植物組織可溶性胞漿蛋白粗提制備試劑盒產品說明書（中文版）
主要用途
YIJI植物組織可溶性胞漿蛋白粗提制備試劑是一種旨在使用物理和化學方法快速充分裂解組織，并在蛋白酶抑制混合劑的幫助下，然后通過差速離心，收集所有細胞漿內可溶性蛋白質的權威而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種新鮮植物組織，包括葉片（leaf）、谷粒（grain）、種子（seed）等樣品。可直接用于后續一維或二維蛋白電泳（SDS-PAGE）、西方雜交（Westernblotting）、親和層析純化（affinity chromotagraphy）、免疫沉淀（immunoprecipitation）、酶活性分析（enzymatic activity analysis）、蛋白質相互作用分析（protein-protein interaction）、特異性表達識別（specific expression identification）和質譜分析等。產品即到即用，性能穩定，操作便捷，收集效果好。
技術背景
通過特殊裂解液和蛋白酶抑制混合劑可以防止裂解后細胞核內各種活性蛋白成分遭到活化的內源性蛋白酶
的破壞，充分保留細胞核內蛋白質的免疫和生物學活性。
產品內容
YIJI清理液（Reagent A） 毫升
YIJI裂解液（Reagent B） 毫升
YIJI活性液（Reagent C） 微升
產品說明書 1 份
保存方式
保存YIJI清理液（Reagent A）在 4℃冰箱里，其余的保存在－20℃冰箱里，有效保證 6 月
用戶自備
液氮管：用于組織凍存處理
15 毫升錐形離心管：用于組織收集后離心
1.5 毫升離心管：用于樣品操作
60 微米尼龍網（NYLON MESH）：用于去除植物組織殘渣
4℃臺式離心機：用于組織收集和去除雜質
4℃微型臺式離心機：用于收集蛋白
DOUNCE 勻漿器：用于組織裂解
實驗步驟
實驗開始前，將試劑盒里的試劑從－20℃的冰箱里取出，放進冰槽里凍融。然后進行下列操作。
1. 準備好植物組織，例如葉片、種子等，并秤重 200 毫克
2. （選擇步驟）放進預冷的 15 毫升錐形離心管
3. （選擇步驟）加入 xx 毫升 YIJI清理液（Reagent A）清洗
4. （選擇步驟）抽去清理液
5. 移入到一個液氮凍存管
6. 即刻放進液氮罐過夜
7. 次日從液氮罐里取出，即刻（最快速度）用研磨棒碾碎組織成粉末狀（注意：切莫使組織凍融）
8. 放進一個新的預冷的 15 毫升錐形離心管
9. 加入 xx 毫升預冷的 YIJI裂解液（Reagent B）
10. 加入 xx 微升 YIJI活性液（Reagent D）
11. 強力渦旋震蕩 30 秒，充分混勻
12. 即刻放進預冷的 DOUNCE 勻漿器，在冰槽里用勻漿棒勻化組織（約 80 下）
13. 將所有組織勻漿物放在 60 微米尼龍網（NYLON MESH）上過濾——此步驟去除組織殘渣
14. 小心移取去渣液到新的 1.5 毫升離心管
15. 即刻放進 4℃微型臺式離心機離心 5 分鐘，速度為 3000g
16. 小心移取上清液到新的 1.5 毫升離心管
17. （選擇步驟）即刻放進 4℃微型臺式離心機離心 5 分鐘，速度為 20000g
18. （選擇步驟）小心移取上清液到新的 1.5 毫升離心管——此步驟為初級胞漿蛋白
19. 即刻放進 4℃微型臺式離心機離心 5 分鐘，速度為 100000g
20. 小心移取上清液到新的 1.5 毫升離心管——此步驟為純化胞漿蛋白
21. 移取 10 微升進行蛋白定量檢測（建議使用 YIJIBradford 蛋白質濃度定量試劑盒－YJ30030.1）
22. 放進－70℃的冰箱里備用
23. 或放進冰槽里，繼續后續操作
注意事項
1． 本產品為 20 次操作
2． 所有操作均須在 4℃狀態下進行
3． 操作時須戴手套
4． 建議一次操作的組織重量在 10 至 250 毫克
5． 建議使用新鮮或冰凍保護良好的植物組織
6． 如果組織含有高濃度的多糖和多酚，建議使用 YIJI多糖/多酚植物組織蛋白制備預處理試劑盒－
YJ30089
7． 碾碎組織步驟：可以將液氮處理的組織放進 15 毫升錐形離心管，然后用針筒擠壓塞研磨
8． 1 克組織通常可以獲得 20 毫克可溶性胞漿蛋白
9． 如果放在－70℃冰箱里儲存備用，避免反復凍融
10．本公司提供系列植物組織細胞分析試劑產品
質量標準
1． 本產品經鑒定性能穩定
2． 本產品經鑒定無蛋白酶污染
