病毒包裝技術8——病毒包裝實驗經驗總結介紹
銳賽小課堂常識篇0703-115
病毒包裝實驗經驗總結
第一，細胞狀態、載體系統、目的基因對病毒包裝影響(基因大小、序列情況、蛋白功能毒性等）是三個主要影響病毒質量的因素。
第二，細胞狀態需要有豐富的細胞培養經驗來判斷，比如包裝或轉染感染前一定要重視細胞干凈細微污染與否、飽滿立體感是否好、鋪板均勻細胞密度適中否等性狀。另外轉染時細胞的密度要十分注意，一般在70%左右。
第三，建議使用商品化的成熟毒載體系統。
第四，至于包裝轉染時的操作控制細節及其轉染試劑因素，需要注意，不要在中途細胞被污染導致整個過程都需要重復。
第五，另一個需要關注的是目的基因的表達載體構建和抽提純化環節，中抽純化是否污染，純度是否到達要求等。這些環節也是保證病毒質量的關鍵環節。
第六，目的基因的大小、序列情況、該目的蛋白的功能毒性等能影響導致包裝的成功與否，我們可以通過更換病毒包裝載體系統，嘗試其他載體系統來實現目的。
病毒包裝實驗經驗總結
第一，細胞狀態、載體系統、目的基因對病毒包裝影響(基因大小、序列情況、蛋白功能毒性等）是三個主要影響病毒質量的因素。
第二，細胞狀態需要有豐富的細胞培養經驗來判斷，比如包裝或轉染感染前一定要重視細胞干凈細微污染與否、飽滿立體感是否好、鋪板均勻細胞密度適中否等性狀。另外轉染時細胞的密度要十分注意，一般在70%左右。
第三，建議使用商品化的成熟毒載體系統。
第四，至于包裝轉染時的操作控制細節及其轉染試劑因素，需要注意，不要在中途細胞被污染導致整個過程都需要重復。
第五，另一個需要關注的是目的基因的表達載體構建和抽提純化環節，中抽純化是否污染，純度是否到達要求等。這些環節也是保證病毒質量的關鍵環節。
第六，目的基因的大小、序列情況、該目的蛋白的功能毒性等能影響導致包裝的成功與否，我們可以通過更換病毒包裝載體系統，嘗試其他載體系統來實現目的。
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參考鏈接:http://www.research-bio.com/h-col-159.html
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