外泌體研究持續升溫，幾乎所有研究者都面臨這樣一個問題：如何獲得足夠多的高純度外泌體。外泌體的提取方法有很多，但提取的外泌體含量、純度等各有優缺點，我們先來了解下幾種常用的外泌體分離方法。

1、差速離心法

差速離心法是根據不同蛋白質分子及囊泡、細胞及細胞碎片等在均勻懸液中沉降速度的差異，通過逐漸增加離心力或離心時間，分離沉淀或上清的方法來提取。1）低速離心去除細胞和凋亡碎片，2）更高速離心以消除更大的囊泡，3）超高速離心沉淀外泌體，然后用0.22μｍ的濾膜去除凋亡小體、微泡等進一步純化。
差速離心法操作簡單，適合大體積樣本中外泌體的分離、提取，不適用于微量及珍貴樣本的研究。

2、密度梯度離心法

目前應用較多的是蔗糖密度梯度離心法，將細胞混合懸液或勻漿置于蔗糖介質的頂部，通過離心力的作用使細胞分層、分離，將外泌體從混雜物質中分離出來，然后使用濾膜進一步純化。
蔗糖密度梯度離心法獲取的外泌體純度高，已作為藥物載體用于臨床試驗。但前期準備工作繁瑣，操作復雜耗時長。

3、qEV尺寸排阻法

qEV是采用尺寸排阻SEC原理按照分子粒徑進行分段分離的方法。將生物樣品流經具有固定孔隙的SEC填充物，吸附粒徑較小的分子如蛋白、脂類等，而較大粒徑的分子或顆粒不能進入孔隙。在緩沖液的作用下，較大粒徑的囊泡（外泌體）流速快，在特定的階段會被洗脫出來進入樣品收集管，成為實驗樣品。而小分子具有較長的保留時間，最后被洗脫出來。

qEV技術有效避免了超速離心和密度梯度離心等傳統方法分離囊泡（外泌體）時，由于超高離心力與蔗糖溶液高粘性造成的HDL蛋白或囊泡的聚集污染，也避免了傳統方法對于囊泡（外泌體）的膜結構的損傷，使其保留完整的生物活性；不過，該方法耗時較長，不適合大量樣本處理。

4、基于聚合物的沉淀技術

基于聚合物的沉淀技術通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合，在4℃溫育并低速離心。用于聚合物沉淀的最常見聚合物之一是聚乙二醇（PEG）。用這種聚合物沉淀具有許多優點，包括對分離的外泌體影響小、pH中性等。目前大多數快速分離外泌體的商品化試劑盒都是基于此方法。 然而基于聚合物的沉淀方法可能會同時分離非囊泡污染物（包括脂蛋白）外泌體純度不高。

華盈生物自主研發的Exosome Isolation Q3（簡稱EIQ3）系列外泌體提取劑盒，不僅有效提高外泌體得率，同時能夠顯著減少雜蛋白殘留（如血清高豐度蛋白）。該試劑盒可以實現血清、血漿、尿液、細胞上清等液質樣本中外泌體的快速提取，為后期外泌體研究的數據穩定性和可靠性提供保障。

華盈生物擁有高純度的外泌體提取方案可以實現多種類型樣品中外泌體的分離，包括血漿/血清、細胞上清、唾液、房水、胸腔積液、腦脊液、尿液、膽汁等多類型樣本。針對不同類型的樣本分別采用專屬的外泌體提取方法，如超速離心、尺寸排阻、密度梯度離心等。還可以提供外泌體三項鑒定以及外泌體蛋白組學等服務助您解決外泌體研究中的各種難題。