疾病動物模型是研究人類疾病發生發展機制、藥物篩選及療效評價必不可少的工具，好的疾病動物模型可以加快新藥的研發速度。你還在為不知道選擇什么小鼠模型發愁嗎？你還在為造模發愁嗎？賽業生物新欄目《每周一鼠》，每周更新，為大家講解一個疾病小鼠模型的故事，希望對大家了解不同的疾病小鼠模型有所幫助。今天和大家見面的是高脂高膽固醇高果糖飲食誘導的NASH小鼠模型。

給予動物高脂、高糖飼料喂養建立的脂肪肝模型，其主要發病機制是營養過剩，食物中脂類、膽固醇和（或）糖類過量，無法完全吸收利用，脂類堆積于肝而引發脂肪肝，進一步出現肝炎性改變及纖維化。該模型與人類非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）相似，是最常見的NAFLD動物模型。

賽業生物通過高脂高膽固醇高果糖飼料（GAN）喂養構建的NASH小鼠模型，可作為闡明非酒精性脂肪肝的病理生理機制以及新藥的開發的動物模型。

構建策略
使用Gubra-Amylin NASH (GAN) 飼料，即高脂高膽固醇高果糖飼料（40%脂肪供能、20 %果糖和2%膽固醇）喂養小鼠26周以上（一般16周開始出現脂肪變性，26周形成NASH，26~32周誘導出纖維化）。

模型驗證

1  體重及血生化檢測

圖1. 使用GAN高脂高膽固醇高果糖飲食誘導的NASH模型的體重及血生化檢測。將野生型C57BL/6雄鼠隨機分為2組，每組10只，分別用標準飼料（control組）和高脂、高膽固醇、高果糖飼料（NASH組）喂養，在不同時間點檢測各項指標：(A)體重；（B）6h空腹血糖值；（C）血清谷丙轉氨酶（ALT）濃度；（D）血清天冬氨酸轉氨酶（AST）濃度；（E）血清總膽固醇（TC）濃度。數據以Mean±SEM呈現。使用Two-way ANOVA進行統計學分析。ns: not significant, *: p<0.05, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001。

結果顯示：建模30周時，NASH組小鼠的體重、6h空腹血糖值、血清中ALT、AST和TC濃度均顯著高于對照組。

2  肝重量、肝重占體重的比值、肝組織體積檢測

圖2. 使用GAN高脂高膽固醇高果糖飲食誘導的NASH模型的肝組織檢測。從造模后第16周開始，每個時間點取2只同批次對照組和NASH組小鼠進行解剖觀察，檢測各項肝指標：（A）肝重量;（B）肝重/體重；（C）飼養26周后小鼠的肝組織。數據以Mean±SEM呈現。使用Two-way ANOVA進行統計學分析。ns: not significant, *: p<0.05, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001。

結果顯示：與對照組相比，NASH組小鼠的肝重量、肝重占體重的比值、肝組織體積均有升高。

3  肝組織病理切片及NAS評分

圖3. 使用GAN高脂高膽固醇高果糖飲食誘導的NASH模型的病理切片及NAS評分。

飼養26周后小鼠的肝組織病理切片：（A）正常對照組小鼠肝小葉結構清晰、完整，肝細胞以中央靜脈為中心，呈放射狀排列,無肝細胞氣球樣變或炎癥細胞浸潤；（B）NASH組小鼠的肝組織小葉結構紊亂，大泡性脂滴占了總細胞的2/3以上，出現嚴重的脂肪變性, 局部以浸潤為主的局灶壞死性炎癥；紅色箭頭：脂肪變性；藍色箭頭：氣球樣變；（C）NASH組小鼠的肝纖維化可以達到F2級標準（moderate中度纖維化）；紅色箭頭：纖維化 ；（D）NAS評分。數據以Mean±SEM呈現。使用Two-way ANOVA進行統計學分析。ns: not significant, *: p<0.05, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001。Scale bar = 100 µm。

肝組織病理切片結果顯示：造模26周后，與對照組相比，NASH組小鼠的肝組織出現了明顯的脂肪變性、氣球樣變與纖維化。此外，NASH組小鼠的NAS評分從造模后第16周開始，均達到了5分，與對照組差異顯著，NASH小鼠造模成功。

除了飲食誘導的非酒精性脂肪肝小鼠模型，賽業生物還可為您提供多種非酒精性脂肪肝小鼠模型（比如 化學物質誘發模型、 基因編輯模型、復合模型）及表型分析服務，如有需要，可以聯系我們為您的研究量身定制。