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重組人纖連蛋白片段常見應(yīng)用介紹

瀏覽次數(shù):1154 發(fā)布日期:2024-7-23  來源:知禾泰克
纖維連接蛋白,也稱纖連蛋白,英文名稱fibronectin(英文縮寫FN)是一種高分子量糖蛋白,F(xiàn)ibronectin可以分為血漿纖連蛋白(plasma FN)和細(xì)胞纖連蛋白(cFN)。在血漿中以可溶性二聚體形式存在,而在細(xì)胞表面和細(xì)胞外基質(zhì)中以二聚體或多聚體形式存在。血漿纖連蛋白由肝細(xì)胞合成,并以一種非活性、緊密的構(gòu)象存在于血流中,它是纖維蛋白凝塊的一個主要組分。細(xì)胞纖連蛋白廣泛存在于細(xì)胞外基質(zhì)中,通過與細(xì)胞表面整合素等受體相互作用,發(fā)揮細(xì)胞黏附、遷移和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。
重組人纖維連接蛋白 (rhFN)是體外表達(dá)的人源性纖維連接蛋白,選取特定的人纖連蛋白功能性片段,表達(dá)密碼子優(yōu)化的重組纖連蛋白,從而既可以解決大量生產(chǎn)的問題,同時也降低了成本,與天然FN功能和效應(yīng)相同。
 
本產(chǎn)品包括細(xì)胞結(jié)合域(central cell-binding domain,含RGD序列),肝磷脂結(jié)合域(heparin-binding domain)和 CS1 位點三個功能區(qū)域。它由 574 個氨基酸組成,分子量 63 kDa。
本產(chǎn)品用重組大腸桿菌基因表達(dá)生產(chǎn)人粘連蛋白片段,高純度,高活性,無動物源性污染。
 
重組人纖連蛋白(rhFN)具有以下主要應(yīng)用:

一、用于細(xì)胞培養(yǎng)
rhFN可促進(jìn)細(xì)胞貼壁、細(xì)胞黏連生長增殖、維持良好細(xì)胞狀態(tài)。用于體外哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基中,可以增強(qiáng)多種細(xì)胞對基質(zhì)的黏附,提高細(xì)胞生長和擴(kuò)增效率,特別適用于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞等的培養(yǎng)。

細(xì)胞的黏連是機(jī)體結(jié)構(gòu)得以維持、細(xì)胞生長完成的必要條件,研究結(jié)果表明:rhFN作為細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),可以促進(jìn)細(xì)胞的黏連生長,使多種細(xì)胞的貼壁率達(dá)到90%以上(對照組為10%),細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)良好,細(xì)胞的代謝率增強(qiáng),DNA、RNA及蛋白質(zhì)合成速度提高約5倍,細(xì)胞的集落率升高幾倍,原代培養(yǎng)的成活率明顯提高,細(xì)胞生長時間縮短。

同時,rhFN能刺激細(xì)胞增殖。作用原理是:rhFN和抗CD3抗體可分別與T淋巴細(xì)胞上的VLA和TCR結(jié)合,兩者共同作用激活酪氨酸激酶pp125FAK,通過Ras途徑刺激T細(xì)胞的增殖和分化,使其獲得上千倍的增殖。
 
二、提高病毒轉(zhuǎn)染效率
本產(chǎn)品能夠大幅地提高逆轉(zhuǎn)錄病毒感染哺乳動物細(xì)胞的感染效率,其作用原理是:細(xì)胞表面 VLA-4 及 VLA-5 可分別與本產(chǎn)品上的 CS-1 位點及細(xì)胞結(jié)合域結(jié)合,逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以與肝磷脂結(jié)合域結(jié)合。
 

在經(jīng)本產(chǎn)品包被的培養(yǎng)容器表面,細(xì)胞與病毒載體以高濃度共存,從而顯著提高病毒的轉(zhuǎn)染效率。
本產(chǎn)品包被在細(xì)胞培養(yǎng)皿表面時,顯著增強(qiáng)了哺乳動物和昆蟲細(xì)胞的轉(zhuǎn)染能力。

三、應(yīng)用于材料表面涂層,促進(jìn)細(xì)胞黏附

纖連蛋白存在于多種動物細(xì)胞表面的大分子細(xì)胞外膜蛋白,是細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜中的主要非膠原性糖蛋白。在細(xì)胞黏附中起中心作用,可調(diào)節(jié)細(xì)胞極性、分化和生長。

rhFN用于3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中制備細(xì)胞外基質(zhì),為細(xì)胞提供更加生理性的微環(huán)境,有利于維持干細(xì)胞的自我更新和定向分化。用rhFN來包被容器可以增強(qiáng)細(xì)胞的附著、生長和分化。與在平坦的2D塑料表面上生長的細(xì)胞不同,包被表面上的細(xì)胞生長更接近天然環(huán)境。

對于貼壁依賴性細(xì)胞系,rhFN可作為非動物源性細(xì)胞附著和生長的有效基質(zhì),用其包被培養(yǎng)容器后,可促進(jìn)多種細(xì)胞的快速附著和良好生長。

將rhFN涂到微球載體上作為細(xì)胞大量生產(chǎn)的介質(zhì),可以節(jié)省空間,節(jié)省原材料,成為應(yīng)用培養(yǎng)細(xì)胞技術(shù)來生產(chǎn)新藥品的基礎(chǔ)物質(zhì)。

還可將rhFN用于醫(yī)療器材、移植物和人工生物材料的表面涂布,可以改善其生物相容性,促進(jìn)體內(nèi)纖維化和血管再生,減少炎癥反應(yīng)和免疫排斥。
 
四、其它應(yīng)用

1、rhFN能提高細(xì)胞的融合率,縮短融合周期,可應(yīng)用于許多科研中,如應(yīng)用于細(xì)胞雜交瘤技術(shù)等。
2、rhFN具有促進(jìn)細(xì)胞遷移、改變細(xì)胞形態(tài)和增強(qiáng)細(xì)胞化學(xué)活動性的能力,可用于3D細(xì)胞培養(yǎng)、組織器官構(gòu)建和創(chuàng)傷修復(fù)中誘導(dǎo)細(xì)胞走向定向遷移與黏附。
3、rhFN參與細(xì)胞外基質(zhì)的組裝與重構(gòu),可用于改善細(xì)胞外基質(zhì)的完整性,增強(qiáng)其功能和穩(wěn)定性。在某些疾病相關(guān)的ECM重構(gòu)障礙中具有潛在治療作用。
4、rhFN可用于促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移與管腔形成,誘導(dǎo)血管發(fā)生,還可用于抗凝血、抗感染和改善組織相容性、創(chuàng)面修復(fù)與組織再生、血管發(fā)生與修復(fù)、 腫瘤治療、肝臟修復(fù)與再生等。

產(chǎn)品特色:
1.     更安全,無任何動物源污染風(fēng)險;
2.     更可靠,批間穩(wěn)定性好,可實現(xiàn)單批次無限量供應(yīng);
3.     更穩(wěn)定,所有生產(chǎn)物料全部國產(chǎn)化,保證供應(yīng)鏈穩(wěn)定;
4.     更優(yōu)惠,聯(lián)系我們的銷售熱線,歡迎申請試用。
 
發(fā)布者:北京知禾新創(chuàng)生物技術(shù)有限公司
聯(lián)系電話:13051765615
E-mail:support@sciprotech.com

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