如果轉染結果不好，建議檢測您的細胞是否有支原體污染。

支原體污染細胞培養(yǎng)物會以多種方式影響您的細胞，其中大多數(shù)會降低實驗結果的可靠性、可重復性和一致性。在真核細胞中觀察到的一些影響可能包括：

由于營養(yǎng)匱乏而導致蛋白質、RNA 和 DNA 合成水平的改變

細胞形態(tài)的變化

細胞因子釋放增加（或減少）
 

支原體污染影響轉染效率

有數(shù)據(jù)表明[1]，由于支原體污染對真核細胞的各種影響，與未污染的細胞相比，支原體污染的細胞轉染后具有較低的基因表達水平。

轉染效率降低很可能是支原體對其宿主細胞產(chǎn)生多種影響的結果，例如它們駐留在細胞膜中，從而調節(jié)細胞膜過程或爭奪營養(yǎng)物質。Yin等人最近證明[2]，支原體污染使細胞轉染效率降低的部分原因是必需氨基酸 L-精氨酸的缺乏。這種 L-精氨酸缺乏是由微生物酶精氨酸脫亞胺酶 (ADI) 引起的，這種酶在支原體中含量豐富，它們負責支原體對 L-精氨酸的分解代謝。

下圖顯示了轉染GFP表達載體的Hela細胞，當細胞感染支原體（M. Fermantans）時，GFP表達水平顯著降低。

除此之外，牢記以下十大守則，遠離支原體污染！
 

MycoAlert™ 支原體檢測試劑盒為您的轉染效率提供支持

為確保您的細胞沒有支原體，建議每兩周定期進行一次支原體檢測。除了日常的監(jiān)測外，我們強烈建議您在轉染實驗開始前檢測支原體，使用沒有支原體污染的細胞進行后續(xù)的實驗，從而進一步提升細胞轉染的效率和活率，減少實驗重復帶來的負面影響，為您的轉染實驗開一個好頭。

MycoAlert™ 支原體檢測試劑盒易于使用且易于集成到碎片化時間中。該檢測通過簡單的兩個步驟，通常可在 20 分鐘內獲得結果。作為一種選擇性生化檢測，其原理為測定支原體酶的活性。這些支原體酶廣泛存在于六種主要支原體細胞培養(yǎng)污染物和絕大多數(shù) 180 種支原體物種中，但不存在于真核細胞中。