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食品中致病微生物的快速檢測流程

瀏覽次數(shù):1989 發(fā)布日期:2022-4-22  來源:杭州大微

食源性疾病是通過飲食進(jìn)入人體內(nèi)的各種致病因子引起的,是具有感染性質(zhì)或中毒性質(zhì)的一類疾病。食品安全檢測技術(shù)是減少食源性疾病的基礎(chǔ),如何快速、準(zhǔn)確檢測食品中致病微生物的殘留成為食品安全檢測問題的重中之重。

目前,就技術(shù)應(yīng)用而言,歐盟使用傳統(tǒng)方法和快速方法的比例各占50%,美國主要以快速方法和分子生物學(xué)方法(如PCR)為主,我國仍沿用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法,繁瑣的檢測程序和冗長的檢測周期已經(jīng)難以滿足食品安全監(jiān)管及企業(yè)/行業(yè)對檢驗(yàn)時(shí)效性的需求。因此,加快食品微生物快速檢測技術(shù)的應(yīng)用推廣對防止食源性疾病的危害具有重要意義。

 

目前常用的食品微生物快速檢測技術(shù)主要分為分子生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、生物傳感器技術(shù)、分析化學(xué)技術(shù)、代謝學(xué)技術(shù)。

 

分子生物學(xué)技術(shù):主要分為基因芯片技術(shù)、核酸探針技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)檢測技術(shù)、核酸恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。

其中PCR 檢測技術(shù)應(yīng)用的范圍較廣,如食品中的大腸桿菌、金葡菌、乳酸桿菌等。該技術(shù)在應(yīng)用中的優(yōu)點(diǎn)是快速且具有一定的靈敏性,能夠有效地檢測出樣品中所含的細(xì)菌。但在應(yīng)用期間也有一定的缺點(diǎn),如只能鑒定核酸序列已知的細(xì)菌,對于細(xì)菌并不能判定死活,在定量上也能力較低。

免疫學(xué)技術(shù):主要分為酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、免疫熒光技術(shù)(immunofluorescence technique, IFT)、免疫磁珠分離技術(shù)、免疫層析技術(shù)。

其中酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)和免疫熒光技術(shù)較為常用。酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)是將熒光技術(shù)與放射免疫技術(shù)結(jié)合,具體過程是將待測的抗原或抗體與固相載體結(jié)合,然后在酶的分解下,底物會產(chǎn)生一定的顏色,通過顏色的深淺來分析待測樣品。

免疫熒光技術(shù)就是應(yīng)用熒光標(biāo)記技術(shù),將抗體及抗原的特異性進(jìn)行有效的結(jié)合,在對細(xì)菌觀察和鑒別中采用的是熒光顯微鏡。該技術(shù)能夠?qū)ι抽T氏菌及葡萄球菌等進(jìn)行快速檢測。

生物傳感器技術(shù):該技術(shù)充分利用了生物敏感材料對于生物的敏感性,將敏感微生物的濃度進(jìn)行有效轉(zhuǎn)換,從而對食品中的微生物進(jìn)行檢測。該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是具有較強(qiáng)的專一性及較高的準(zhǔn)確度,操作起來方便快捷,一般的檢測時(shí)間不超過 20min,最快的在 1min 內(nèi)就能得到結(jié)果。

分析化學(xué)技術(shù):主要分為氣相色譜法和高效液相色譜法、微生物自動檢測法。

不同的微生物在化學(xué)組成及代謝產(chǎn)物上有所不同,因此,通過氣相色譜法及高效液相色譜技術(shù)直接分析液體中的細(xì)菌成分,對微生物的特異化學(xué)標(biāo)志成分進(jìn)行有效判定,從而利于微生物的診斷和檢測。

代謝學(xué)技術(shù):主要分為三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)生物發(fā)光技術(shù)、電阻抗技術(shù)、微熱量計(jì)技術(shù)、放射測量法。

其中的三磷酸腺苷生物生物發(fā)光技術(shù)應(yīng)用范圍較廣,其原理是在熒光素酶和Mg2+的作用下,熒光素與ATP發(fā)生腺苷酰化反應(yīng)后被活化,活化的熒光素與熒光素酶相結(jié)合,形成了熒光素-AMP復(fù)合體焦磷酸(PPi)。該復(fù)合物在氧化作用下,產(chǎn)生熒光信號。通過ATP檢測液檢測微生物ATP的發(fā)光量,達(dá)到檢測細(xì)菌的目的。

 

食品中的微生物尤其是致病菌具有檢出率高但是含量低的特點(diǎn),故檢測方法的靈敏度和限量要求之間有著很大的差異。ATP生物熒光法無需培養(yǎng)微生物過程,操作簡便的同時(shí)靈敏度高,縮短檢測時(shí)間,降低人工成本,是目前微生物檢測最快的方法之一。

杭州大微通過將ATP熒光原理與微生物特性相結(jié)合,開發(fā)了DW-ES800型微生物實(shí)時(shí)檢測系統(tǒng)。這款創(chuàng)新型的系統(tǒng)分為酶-底物反應(yīng)法培養(yǎng)模塊和實(shí)時(shí)光電檢測模塊兩個(gè)部分:培養(yǎng)模塊實(shí)現(xiàn)30個(gè)微生物檢測拭子的自動培養(yǎng),光電檢測模塊采用了高靈敏的光電二極管技術(shù)和簡潔易用的操作設(shè)計(jì)。

該系統(tǒng)不僅可用于各企業(yè)中消毒效果檢測,還可用于水質(zhì)分析、食品、保健品、化妝品、餐飲企業(yè)等行業(yè)中總大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌、細(xì)菌總數(shù)等指標(biāo)的檢測。

在傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)理論的基礎(chǔ)上,杭州大微還將染色、新光源和光子探測技術(shù)、二氧化碳傳感技術(shù)結(jié)合,推出了DW-BT100型快速微生物定量檢測系統(tǒng),通過雙溫光電檢測系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)控制的模塊化分析系統(tǒng)來監(jiān)控微生物生長代謝所引發(fā)的光密度和顏色的變化。

DW-BT100型快速微生物定量檢測系統(tǒng)縮短檢測時(shí)間,簡化傳統(tǒng)微生物的檢測方法,該技術(shù)目前已被廣泛用于乳制品、食品保健品、化妝品的微生物檢測以及水廠、政府監(jiān)管部門、科研院所。

 

大微簡介:

杭州大微生物技術(shù)有限公司是微生物檢測儀器研發(fā)、生產(chǎn)及銷售的高新技術(shù)企業(yè),總部位于杭州良渚國際生命科技小鎮(zhèn)。創(chuàng)立于2008年,已獲6項(xiàng)國家專利和4項(xiàng)軟件著作權(quán),致力于推動中國工業(yè)微生物檢測實(shí)踐的“快速、簡單、自動化”和標(biāo)準(zhǔn)化! 

“杭州大微”品牌DW系列微生物儀器:微生物樣品前處理自動化系列、厭氧及微需氧微生物培養(yǎng)系列、微生物鑒定分型溯源系列、微生物快速檢測系列。

“杭州大微”品牌產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于:食品安全、制藥工業(yè)、疾病防控、環(huán)境衛(wèi)生及醫(yī)療等大健康領(lǐng)域。

發(fā)布者:杭州大微生物技術(shù)有限公司
聯(lián)系電話:400-617-1706
E-mail:info@dw-microbiology.com

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