小鼠乳腺癌細(xì)胞(4T1)培養(yǎng)要點(diǎn)
細(xì)胞名稱：小鼠乳腺癌細(xì)胞
細(xì)胞簡稱：4T1
產(chǎn)品貨號：TCM-C705
種屬來源：小鼠
組織來源：乳腺
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)體系：RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
傳代比例：1:3-1:6，每2-3天換液一次
傳代周期：48-72 h
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%CO2，溫度：37℃
4T1細(xì)胞培養(yǎng)注意要點(diǎn)
1. 小鼠乳腺癌細(xì)胞（4T1）細(xì)胞特性
2. 小鼠乳腺癌細(xì)胞（4T1）注意事項(xiàng)
4T1細(xì)胞推薦消化步驟：
細(xì)胞簡稱：4T1
產(chǎn)品貨號：TCM-C705
種屬來源：小鼠
組織來源：乳腺
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)體系：RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
傳代比例：1:3-1:6，每2-3天換液一次
傳代周期：48-72 h
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%CO2，溫度：37℃
4T1細(xì)胞培養(yǎng)注意要點(diǎn)
1. 小鼠乳腺癌細(xì)胞（4T1）細(xì)胞特性
① 小鼠乳腺癌細(xì)胞（4T1）為貼壁細(xì)胞，上皮細(xì)胞樣，細(xì)胞在低密度時(shí)及傳代第二天會有少量細(xì)胞為圓形或沒有上皮細(xì)胞形態(tài)的細(xì)胞，期間不要換液，一般傳代48h后會恢復(fù)正常。
② 4T1傳代周期較短，在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)體系RPMI-1640+10%FBS中，倍增時(shí)間在24h左右，細(xì)胞傳代比例1:6-1:8，傳代周期2-3天。2. 小鼠乳腺癌細(xì)胞（4T1）注意事項(xiàng)
① 4T1細(xì)胞密度越高消化時(shí)間越長，建議細(xì)胞密度80%進(jìn)行傳代，消化時(shí)間約5-10min。（不同品牌、不同溫度的胰酶可能消化時(shí)間有區(qū)別）
② 4T1細(xì)胞在密度高于80%，或者在同一個(gè)培養(yǎng)器皿中培養(yǎng)時(shí)間過長，會導(dǎo)致細(xì)胞難消化，推薦使用分步消化的方式進(jìn)行。4T1細(xì)胞推薦消化步驟：
a. 去除細(xì)胞上清，使用0.25%胰酶替代PBS清洗一遍；
b. 加入適量胰酶，放入37℃培養(yǎng)箱消化，5min左右取出觀察一次；
c. 如觀察到有大部分細(xì)胞變圓，可輕拍瓶身，如細(xì)胞不可脫落則延長消化時(shí)間。
d. 如觀察到有部分細(xì)胞脫落，則將已經(jīng)脫落的細(xì)胞懸液收集到離心管中加入完全培養(yǎng)基中止消化，原瓶中再次加入新鮮胰酶重復(fù)消化一次。
e. 將分次消化的細(xì)胞懸液集中在一起進(jìn)行離心，去除上清后按照1：6-1：8的比例進(jìn)行分瓶。
f. 傳代后第二天細(xì)胞不需要換液處理，一般2-3天即可長滿。③ 血清質(zhì)量差異可能引起倍增時(shí)間波動，建議選用高質(zhì)量的胎牛血清。推薦使用4T1細(xì)胞專用培養(yǎng)基（TCM-G705）。
標(biāo)簽：
細(xì)胞培養(yǎng)
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