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ECHO REVOLVE顯微鏡在環(huán)境鎘、細菌和宿主相互作用研究中的應用

瀏覽次數(shù):1087 發(fā)布日期:2022-6-24  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負

前言

環(huán)境鎘的膳食攝入量高,生物半衰期長,直接或通過腸道微生物群損害生理功能,是一種嚴重的健康風險。然而,環(huán)境鎘對微生物和宿主系統(tǒng)的毒性機制尚不清楚。中科院營養(yǎng)代謝與食品安全重點實驗室和上海交通大學醫(yī)學院的科學家在《Hazardous Materials》雜志聯(lián)合發(fā)表了一篇名為《Cadmium accelerates bacterial oleic acid production to promote fat accumulation in Caenorhabditis elegans》的文章,本研究建立了三個線蟲和大腸桿菌培養(yǎng)系統(tǒng),以研究微生物在鎘誘導的脂質(zhì)毒性中的重要作用,闡明了鎘通過細菌代謝物在體內(nèi)誘導脂質(zhì)積累的機制,并揭示了環(huán)境鎘、微生物和宿主之間的相互作用。
 


 

本研究使用ECHO REVOLVE正倒置一體熒光顯微鏡(RVL-100-G,Discover ECHO,US)檢測VS29蠕蟲的GFP熒光。激發(fā)和檢測波長分別為470–495 nm和510–550 nm。使用圖像處理和分析軟件對熒光圖像進行分析,計算其平均熒光密度。
 

圖A  ECHO REVOLVE正倒置一體熒光顯微鏡拍攝轉(zhuǎn)基因VS29蠕蟲中GFP:dgat-2表達的代表性圖像(左圖)和相對定量(右圖)(n≥ 15) 在成年期的第1、3、5和7天。比例尺:210µm。
 

研究表明,鎘暴露導致細菌代謝物的組成存在顯著差異。油酸被確定為表達差異最大的代謝物。鎘暴露顯著增加了油酸的含量,表明鎘具有特定的誘導效應。通過在正常和代謝失活系統(tǒng)中直接添加到秀麗隱桿線蟲,進一步證實了油酸對體脂積累的影響。因此,研究發(fā)現(xiàn)鎘誘導的復合差異(尤其是油酸的增加)而不是數(shù)量變化介導了鎘對宿主的影響。除了油酸的產(chǎn)生外,還發(fā)現(xiàn)低劑量鎘暴露可提高細菌中油酸合成相關基因(fabA、fabB、fabD、fabG、fabH、fabI、fabZ和accA)的表達。并且添加油酸增加了秀麗隱桿線蟲的脂質(zhì)合成和代謝相關基因(fat-5、fat-7、acs-11和sbp-1)的表達,這與鎘暴露線蟲中的現(xiàn)象相似。值得注意的是,與鎘暴露不同,油酸對秀麗隱桿線蟲體內(nèi)脂質(zhì)積累的影響是直接且獨立于培養(yǎng)系統(tǒng)的,這表明升高的細菌油酸是環(huán)境鎘促進宿主體內(nèi)脂質(zhì)積累的效應器。綜上所述,本研究提出了一個模型來說明環(huán)境鎘、細菌和線蟲之間的相互作用。本研究首先集中于環(huán)境中低劑量鎘引起的細菌代謝產(chǎn)物改變及其對鎘暴露與宿主毒性之間關系的影響。

本研究還探究了維生素D3在鎘誘導的脂肪積累中的作用。補充維生素D3可顯著降低低劑量鎘加速的秀麗隱桿線蟲體內(nèi)的脂肪含量,表明補充維生素D3有可能防止環(huán)境鎘暴露引起的脂肪異常積累。
 

研究亮點:

▶  本研究發(fā)現(xiàn)在有活細菌系統(tǒng)中的線蟲,鎘提高了細菌代謝產(chǎn)物油酸的產(chǎn)生,并提高了其合成基因的表達。從而進一步促進了線蟲脂肪代謝相關基因的表達和脂肪沉積。

▶   本研究發(fā)現(xiàn)了維生素D3的潛在保護作用,可以顯著防止鎘或油酸誘導的脂肪沉積,可以降低環(huán)境鎘的脂質(zhì)毒性,這些發(fā)現(xiàn)為鎘引起的健康風險和毒理學機制提供了深入的見解。

原文:https://doi.org/10.1016/j.jhazmat.2021.126723

 

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