細胞培養(yǎng)在各位研究生的日常實驗中占據(jù)了相當多的時間，你的細胞如果有幸養(yǎng)的很好，真是你好我好大家好，實驗事半功倍；細胞培養(yǎng)差的學生，說多了都是淚，自掛東南枝了，一把鼻涕一把淚。

細胞培養(yǎng)技術(shù)是細胞生物學研究方法中重要和常用的技術(shù)，通過細胞培養(yǎng)既可以獲得大量細胞，又可以借此研究細胞的信號轉(zhuǎn)導、細胞的合成代謝、細胞的生長增殖等，那下面進入正題，分享一下細胞培養(yǎng)的秘籍。

以動物細胞為例，動物細胞培養(yǎng)需要的一些特殊條件。
 

① 加胎牛血清培養(yǎng)基：

動物細胞離體培養(yǎng)常常需要血清。各種細胞合成培養(yǎng)基（如MEM、RPMll640、DMEM）只提供細胞生長所需的各種基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)，包括碳水化合物、氨基酸、無機鹽、維生素等。血清提供生長必需因子，如激素、微量元素、礦物質(zhì)和脂肪。根據(jù)不同細胞的需求，一般含有10%～20%的血清培養(yǎng)基即可維持細胞較快的生長增殖速度。

② 無菌環(huán)境：

無毒和無菌是體外培養(yǎng)細胞的首要條件。使用的各種試劑和耗材要經(jīng)過高壓或紫外線滅菌。嚴格的無菌操作是養(yǎng)好細胞的必要前提。為防止細胞受到微生物感染，可在培養(yǎng)基中加入雙抗。

③ 溫度和氣體環(huán)境：

一般動物細胞在體外培養(yǎng)的適宜溫度是37℃，不適宜的環(huán)境溫度會影響細胞的生長甚至死亡。二氧化碳和氧氣的比例要在細胞培養(yǎng)過程中不斷進行調(diào)節(jié)，一般維持在5%。二氧化碳既是細胞的代謝產(chǎn)物，又與維持培養(yǎng)液的pH密切相關(guān)。

如何防控污染：保持良好的操作習慣，超凈臺要紫外滅菌30min，以70%的乙醇擦拭無菌操作臺，開啟超凈臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗。
 

每次只處理一種細胞，以免失誤混淆或細胞間污染，操作不要觸碰吸管尖頭部或容器口等。

像對待孩子一樣養(yǎng)細胞，它很脆弱，最好每天關(guān)注一下，以免出現(xiàn)培養(yǎng)箱缺二氧化碳，停電、溫度不夠等現(xiàn)象。

避免全軍覆沒，好細胞要及時保存，有備用的細胞，這樣即使有細胞污染還可以有備用的細胞頂上，不至于太惱火，好習慣要保持。

不同細胞喜好不同，需要在培養(yǎng)中慢慢體會，例如平滑肌細胞比較好長，2-3天可能就會有很多細胞，應(yīng)該算是比較好養(yǎng)活的；內(nèi)皮細胞分泌物較多，需要時不時換洗才會長的好等等。

培養(yǎng)好的細胞會被安排不同的實驗，有的看趨勢、有的看狀態(tài)、有的看蛋白表達，有的看共定位，最終它們都會和顯微鏡打交道，那我們就聊聊顯微鏡和細胞的不解之緣。

根據(jù)不同的細胞實驗需求，使用的顯微鏡也不盡相同：

Echo Rebel數(shù)字化顯微鏡，具備明場、相差觀察方式和正倒置一體特點。可以觀察培養(yǎng)瓶、孔板和培養(yǎng)皿里面的細胞形態(tài)，根據(jù)細胞狀態(tài)，您可以及時調(diào)整實驗條件。同時Echo Rebel數(shù)字化顯微鏡具有自動細胞計數(shù)和測量等功能，可以用來細胞計數(shù)和做細胞劃痕實驗，如果您的細胞不涉及到熒光實驗，Echo Rebel數(shù)字化顯微鏡基本可以滿足你的需求。

▲ 成骨細胞
 

▲ 細胞計數(shù)
 

Echo Revolve Gen2熒光顯微鏡具有自動熒光系統(tǒng)可以做到開機即用，一鍵熒光系統(tǒng)切換，搭配的DHR和Z-Stack功能可以使細胞成像更清晰。即可以做到明場觀察細胞形態(tài)，同時也可以做GFP蛋白轉(zhuǎn)染的細胞實驗。Echo Revolve Gen2熒光顯微鏡還可以用來檢測是否轉(zhuǎn)染進細胞。DHR和Z-Stack的搭配可以更清楚的研究細胞內(nèi)蛋白分布表達情況等。
 

 

Echo Revolution自動化顯微成像系統(tǒng)具備Revolve的所有功能并在此基礎(chǔ)上升級，使之專為活細胞觀察而生。HyperScan高速拼接大視野成像功能，即可以快速掃描整個樣品孔又能解決高倍鏡下視野小的問題，可以更清晰和整體的觀察細胞形態(tài)。延時攝影成像功能（TimeLapse）結(jié)合自動對焦與長時間鎖焦，再搭配活細胞工作站和全自動載物臺，可以實現(xiàn)活細胞長時間觀察，從而研究細胞的生長和發(fā)育過程，對研究干細胞誘導分化成器官的整個過程具有重要意義。而孔板導航成像功能（Multi-well Point）可以對不同孔位進行自定義掃描和觀察，研究不同實驗條件對活細胞的影響。
 

培養(yǎng)細胞需要耐心及不斷的積累和摸索，了解它們，呵護它們，相信這個小小的細胞會成長的很好。小編就先介紹到這里，我們的顯微鏡可以申請試用哦，請撥打電話010-57256059聯(lián)系我們。