弓形蟲PCR檢測試劑盒使用方法與產(chǎn)品特點
瀏覽次數(shù):301 發(fā)布日期:2020-12-18
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弓形蟲PCR檢測試劑盒產(chǎn)品特點:
準(zhǔn)確:整個過程閉管操作,防止污染,產(chǎn)品(與痰液培養(yǎng)相比)總符合率達94.64%;
靈敏:靈敏度高,zui低檢出限可達10菌/mL;
快速:從獲得DNA樣本到給出結(jié)果,只需2-3小時;
友好:獲得核酸后,只需一步加樣操作,無需PCR后處理,即可自動獲得結(jié)果;
高通量:在常規(guī)熒光定量PCR儀上運行一次,可同時檢測94個樣本。
弓形蟲PCR檢測試劑盒使用方法:
1.樣本處理(樣本處理區(qū))
1.1.先對痰液樣本進行目測,若樣本中唾液占大部分,則需重新采集樣本。
1.2.目測合格后,在樣本中加入2~3倍體積4%的NaOH溶液,〈采希?50rpm、37℃條件下處理30min或常溫下1Hr,使其充分液化(無明顯固狀物并且吸出時無拖絲現(xiàn)象即為液化完全;若液化不完全,可適當(dāng)再加入少量4%的NaOH溶液直至液化完全)。
1.3.取液化后的樣本900ul以及試劑盒中的陰性對照、強陽性對照和臨陽性對照各500ul于1.5ml無菌離心管中,13,000rpm離心10min。
1.4.棄上清(先倒出大部分液體,再用移液器盡量吸干至無明顯液滴為止),沉淀中加入1ml滅菌生理鹽水,弓形蟲PCR檢測試劑盒振蕩懸浮(注意:按緊離心管蓋后,橫向按在旋渦振蕩器上將沉淀振起),13,000rpm離心10min。
1.5.棄上清,用1ml滅菌生理鹽水洗滌沉淀,13,000rpm離心10min。
1.6.棄上清,向沉淀中加入DNA提取液30ul,振蕩混勻,2,000rpm離心5sec,放37℃溫浴30min,再放入100℃水浴/干浴10min,13,000rpm離心10min,保留上清備用。(如果樣本裂解產(chǎn)物當(dāng)天不使用,請于-20℃保存。)
2.擴增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))