單細(xì)胞分離與孔板成像組合的高效細(xì)胞株開發(fā)流程
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細(xì)胞活率低？實驗效率低？新方式助力細(xì)胞株開發(fā)
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| 在生物藥物分子?(如抗體)?的生產(chǎn)過程中細(xì)胞株開發(fā)及單克隆性確認(rèn)是非常關(guān)鍵的步驟。細(xì)胞株開發(fā)起于將表達(dá)目的蛋白的基因轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞。通過分離高效表達(dá)目的蛋白的單個活細(xì)胞即可建立細(xì)胞株。在這個過程中，單克隆性的記錄至關(guān)重要，用于確保細(xì)胞株的基因重現(xiàn)性。隨后的步驟涉及細(xì)胞克隆的產(chǎn)量、質(zhì)量和穩(wěn)定性的表征?(如下圖)。 |
| 細(xì)胞株開發(fā)的典型工作流程 |
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當(dāng)前細(xì)胞株開發(fā)的工作流程有一些局限，如低細(xì)胞活率、低效的單細(xì)胞分離以及有限的單克隆性證據(jù)。有限稀釋，一種傳統(tǒng)分離單細(xì)胞的方法，依賴于統(tǒng)計概率，無法提供單克隆性的可視化證據(jù)。此外，該技術(shù)的效率非常低，最終導(dǎo)致每塊微孔板上可供篩選的克隆非常少。
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| CloneSelectTM高通量單細(xì)胞分離系統(tǒng)是一個新穎的臺式設(shè)備用于柔和精確地從液體樣品中分離出單個活細(xì)胞。單細(xì)胞分離系統(tǒng)采用微流控分離槽以精確地分離單個細(xì)胞，同時最小化分離不同細(xì)胞可能帶來的交叉污染的風(fēng)險。當(dāng)單細(xì)胞分離系統(tǒng)與?CloneSelectTMImager?(CSI)?細(xì)胞生長分析系統(tǒng)的快速成像技術(shù)配合，可以顯著提高細(xì)胞株開發(fā)流程的效率。 |
| CloneSelectTM單細(xì)胞分離系統(tǒng)的技術(shù)原理 |
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本篇應(yīng)用文章我們將介紹結(jié)合單細(xì)胞接種和單克隆性驗證的工作流程。我們利用單細(xì)胞分離系統(tǒng)和CSI接種單細(xì)胞至微孔板，然后確認(rèn)這些細(xì)胞的存在并記錄他們在隨后幾天里的生長過程。最后，我們將介紹如何生成包含單克隆性證據(jù)的文件用于提交監(jiān)管機構(gòu)審批。
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