紅細胞裂解液操作方法
瀏覽次數:362 發布日期:2020-1-21
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紅細胞裂解液(RBL Buffer)是一種從組織或血液中分離淋巴細胞、單核細胞或其它種類的細胞,特異地裂解紅細胞,以去除由于紅細胞混雜所造成的干擾的裂解液。通過其優化配方,此裂解液可在單細胞懸液中(如小鼠脾臟單細胞懸液和人末梢血樣品)大程度的裂解紅細胞,同時最小程度的影響其它種類的細胞。本裂解液不適用于有細胞核紅細胞的裂解,如鳥或禽類的紅細胞。
紅細胞裂解液操作方法
1. 該制品濃度為1×,可直接使用。
2. 向1倍體積抗凝全血中加入5倍體積的RBL Buffer,混合均勻,室溫放置10min使紅細胞充分裂解為透明狀。例如:向1 ml抗凝全血中加入5ml RBL Buffer充分混合均勻。
3. 3000rpm室溫離心10min,棄上清,留取底部細胞團塊。
4. 重新加入5倍體積的RBL Buffer重懸底部細胞團塊,用移液器反復吹吸混合均勻,室溫放置10min。
5. 3000rpm室溫離心10min,棄上清,留取底部細胞團塊。如仍然存在明顯的紅細胞,則重復步驟4直至沒有紅細胞為止。