老子說：治大國如烹小鮮。
網(wǎng)友說：待細胞如養(yǎng)熊貓。

細胞的生命極其脆弱
消化一定程度上是對它們的一種折磨

所以做好細胞消化，
善待你的細胞們
一些細節(jié)要注意

在使用胰酶（Trypsins）細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。
胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差，做流式時的CD Marker 也可能會下降。

細胞消化心得

對大部分細胞消化來說，可以在消化到差不多快要脫落的時候，移除大部分胰酶，然后直接加新鮮的培養(yǎng)基將細胞吹打下來，省去離心步驟。殘余的胰酶含量很低，所以不會對細胞產(chǎn)生任何影響。
對于難消化的細胞，如HCT15, LS411和KM12，用不含Ca²⁺，Mg²⁺的PBS洗滌一次后，加入稍微多一點胰酶，置37ºC徹底消化(一般為幾分鐘)至脫落（一晃細胞就掉下來），然后再加培養(yǎng)基終止胰酶反應(yīng)、離心 (若是無血清培養(yǎng)基，需改加胰酶抑制劑)。這么做的道理是，細胞消化不徹底，勢必會增加吹打輔助脫落的次數(shù)，而吹打次數(shù)越多，細胞活性越差。

正確選擇細胞消化試劑
BI提供動物來源的傳統(tǒng)胰酶及基因工程生產(chǎn)的重組胰蛋白酶。

動物胰酶普遍用于血清培養(yǎng)，不同的細胞加入胰酶的成分和濃度不一樣。貼壁不牢和半貼壁細胞盡量使用濃度0.05%不含EDTA的胰酶且不需要放在培養(yǎng)箱孵育，這樣易于控制，對細胞的傷害也降到最低。對于難消化的細胞就需要使用含EDTA的0.25%的胰酶，而不是無限的延長消化時間。

EDTA有什么作用呢？許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用胰酶/EDTA聯(lián)合作用。胰酶切割ECM負責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca²⁺，抑制Integrin的貼壁活性，所以EDTA的作用更加溫和。
重組胰酶用于無血清培養(yǎng)。重組胰酶具有與動物源性胰蛋白酶相同的酶學(xué)性質(zhì)，但是不含任何動物源成分，可替代胰蛋白酶使用。
BI生產(chǎn)的重組胰酶Recombinant Trypsin EDTA Solution ，堪稱傳統(tǒng)胰酶的完美替代者。無雜酶，無外源性或內(nèi)源性病毒污染，無PMSF、EDTA等任何蛋白酶抑制劑，較傳統(tǒng)的胰酶使用方便，在細胞培養(yǎng)實驗中減少了很多不必要的操作，細胞培養(yǎng)效果大大提高了。