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瘦素elisa試劑盒操作技巧

瀏覽次數:5221 發布日期:2019-3-21  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
       瘦素elisa試劑盒應用于雙抗體夾心法測定標本中人瘦素(leptin)水平。用純化的人瘦素(leptin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入瘦素(leptin),再與HRP標記的瘦素(leptin)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的瘦素(leptin)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人瘦素(leptin)濃度。
操作技巧:
1、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
3、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、脫鎂葉綠素a氧化酶酶免ELISA試劑盒保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
操作注意事項
1、當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。
2、請每次測定的同時做標準曲線,zui好做復孔。
3、一次加樣時間zui好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4、洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
5、如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數。
6、底物請避光保存。
7、在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。
發布者:上海研生實業有限公司
聯系電話:021-59963601
E-mail:3004902019@qq.com

標簽: elisa試劑盒
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