脂肪干細胞的有效分離、培養及保存方法
瀏覽次數:720 發布日期:2018-11-27
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近日,經研究人員試驗發現,旨在分離、培養和凍存大鼠脂肪干細胞,并對其相關的細胞表型進行研究,為利用脂肪干細胞治療梗阻性腎*腎纖維化等實驗提供依據。研究指出,建立了一種脂肪干細胞的有效分離、培養及保存方法,并對其表面標志物進行鑒定,為利用脂肪干細胞進行進一步的實驗研究提供了依據。
取大鼠3只,經消毒麻醉,采集其腹股溝處脂肪組織分離培養其中的脂肪干細胞,用相差倒置顯微鏡觀察細胞生長方式及形態變化。取第三代細胞用流式細胞儀作細胞免疫表型的鑒定。凍存復蘇后再次檢測干細胞生長情況及表型。
大鼠脂肪組織中含有大量間充質干細胞,原代培養的ASCs呈小圓形或星形,經傳代后的脂肪干細胞形態比較均一,呈長梭形,個別略呈多角形、漩渦樣生長。其細胞表型為CD29、CD44高表達,CD73、CD105中等程度表達,CD34極低表達。脂肪干細胞經低溫凍存3個月,復蘇后,生長活力和存活率與凍存前未見明顯區別,CD44和CD29檢測與凍存前表達率也一致。