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干細胞培養基的使用

瀏覽次數:5859 發布日期:2012-3-1  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
干細胞培養基的選擇
 
研究背景:
小鼠骨髓間充質干細胞的目前干細胞培養難點。小鼠的骨髓基質細胞成分復雜,間充質干細胞比率低,分離培養有一定的難度。廣東醫學院的博士研究生陳博士在培養過程中就遇到該問題。他曾成功飼養成人和大鼠骨髓間充質干細胞。但新近培養的小鼠間充質干細胞狀態就很差。按照自己的分析:細胞培養操作沒有問題,培養條件也不錯,試劑來源可靠。問題應該出現在培養基配方上。陳博士以原來的骨髓間充質干細胞培養基為基礎,按照導師的提點,修改了配方,但細胞不好不壞。為此他做了兩次正交,結果缺總不理想,細胞狀態并不穩定。陳博士為此焦頭爛額,擔心下一步的實驗無法進行。經朋友介紹找到百恩維公司的技術支持。
 
解決方案:
百恩維的干細胞技術專家了解了陳博士的情況,培養技術、取材和試劑來源等,覺得不存在大問題;問題主要的原因是培養基的成分配比。建議陳博士重新配制培養基或使用現成的完全培養基。陳博士為了加快實驗進度,直接選用了百恩維小鼠骨髓間充質干細胞培養基。
 
選用產品:小鼠間充質干細胞培養基 (Catalog No. BW110014)
 
實施步驟:
1、  使用百恩維的小鼠間充質干細胞培養基,進行原代的取材;
2、  同樣時間下,百恩維的培養基的MSC細胞狀態明顯優于自己配置的培養液;
3、  經過傳代,細胞的狀態和增殖能力都很好;
4、  成功獲得了足夠進行下一步實驗所需的mouse MSC。
 
結果分析:細胞狀態良好,成梭狀、緊密分布,大小較均勻。目前已經傳至20代。對于這次走的彎路,陳博士感慨良多。要高效的完成課題實驗,就需要轉變觀念,合理利用和整合現有的各個優勢資源,快速達到實驗目標。
 
案例分析:目前成功的間充質干細胞培養液主要包含DMEM+FBS+谷氨酰胺+雙抗。其中FBS的品牌和批次對細胞都會有不同的影響;無菌技術不成熟的新手,或者無菌條件不完善的實驗室,最好使用雙抗。最后,各成分的配比也有較大影響:大部分間充質干細胞適用低糖,加約10%的FBS等等,對不以尋找配方為目的的干細胞研究人員,我們建議直接使用經過不斷優化和嚴格質量檢測的百恩維干細胞培養基,提高科研效率。
 
發布者:百恩維生物科技有限公司
聯系電話:0755 26980323 802
E-mail:597817480@qq.com

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