本實驗室剛引進默克密理博與路明克斯2010年最新推出的新一代磁珠多重檢測系統MAGPIX,現正式對外開放使用,液相芯片技術是一個非常適合生物標志物探索研究的工具,只需25μl的樣品,即可同時檢測多達上百個指標。
本實驗室為上海正規科研共享服務平臺,現正式對外開放提供流式細胞檢測,流式分選,熒光定量PCR,半定量RT-PCR,Western Blot,ChIP,免疫組化,高效液相蛋白芯片,靶基因預測,啟動子構建,細胞培養,PCR產物純化及形態學(石蠟切片,冰凍切片,免疫熒光,HE染色,拍照,細胞爬片等)。
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傳統的蛋白芯片技術是將蛋白質分子有序地固定在濾膜、滴定板和載玻片等固相載體上,用標記了特定熒光抗體的蛋白質等生物分子與芯片作用,再利用熒光或激光掃描技術測定其熒光強度,通過熒光強度分析蛋白質與蛋白質的相互作用,從而達到研究蛋白質功能或免疫診斷的目的。但固相載體難于維持蛋白質的天然構象,不利于蛋白質功能研究。
液相芯片技術在國際上被稱之為xMAP(flexible MultilyteProfiling)技術,其核心技術是乳膠微球包被、熒光編碼以及液相分子雜交。液相芯片體系以聚苯乙烯微球(beads)為基質,微球懸浮于液相體系,每種微球可根據不同研究目的標定上特定抗體或受體探針,可對同一樣品中多個不同的分子同時進行檢測。微球表面可進行一系列修飾以適合固定各種蛋白、多肽或核酸等生物分子。xMAP技術可應用于蛋白或核酸的功能及其相互作用研究,分別稱之為液相蛋白芯片技術和液相基因芯片技術。
液相蛋白芯片體系主要包括微球、蛋白探針分子、被檢測物和報告分子四種成分。在液相系統中,為了區分不同的探針,每一種用于標記探針的微球都帶有獨特的色彩編碼,其原理是在微球中摻入不同比例的紅色分類熒光及發色劑,可產生100種顏色差別的微球,可標記上100種探針分子,能同時對一個樣品中多達100種不同目標分子進行檢測。反應過程中,探針和報告分子都分別與目標分子特異性結合。結合反應結束后,使單個的微球通過檢測通道,使用紅、綠雙色激光同時對微球上的紅色分類熒光和報告分子上的綠色報告熒光進行檢測,可確定所結合的檢測物的種類和數量。