智能熱板儀,熱板測痛儀(熱板法)
【目的】
1.掌握鎮痛藥的實驗法。
2.觀察羅通定的鎮痛作用。
【原理】
熱板法是鎮痛藥物篩選中常用的一種方法,也是一種能確定區分中樞神經末梢神經鎮痛機理的方法,有較廣的使用范圍,熱板法對動物組織損傷最小,動物可反復使用,痛反應潛伏期較長,便于觀察及測出藥物之間的較小差異,比較出藥物作用的強弱快慢及持續時間。
將小鼠置于一定溫度的熱板上,熱刺激小鼠足部產生痛反應,即舔足反應。以小鼠出現舔足的時間作用為痛反應指標,判斷藥物是否具有鎮痛作用。
【器材】 熱板儀、天平、注射器等。
【動物】 小鼠
【藥品】 0.2%羅通定、生理鹽水(NS)
【方法一】
1.預選動物:預選30s內有痛反應的小鼠。將小鼠置于熱板儀內,溫度55±0.5℃,測定小鼠的痛閾值,測2次,每隔5min測量1次,以小鼠舔后足作為觀察指標。
2.分組及給藥:取預選合格的小鼠4只,隨機分為二組,2只/組,一組:ip生理鹽水0.2ml/10g體重;二組:0.2%羅通定 0.2ml/10g體重。
3.給藥后20、40min測定痛閾值,若小鼠60s內無痛反應,立即取出,按60s計算。
1、實驗前預篩選:以小鼠為例,取若干只小鼠,實驗前24h腹部去毛,將小鼠逐只置于(55.0±0.5)℃熱板儀上,測定記錄小鼠的痛閾值,以舔后足為痛覺指標,挑選痛閾值為5~30s的小鼠進行實驗。
2、 給藥前痛閾值的測定:將篩選出的小鼠逐只置于熱板儀上,各測2次痛閾(間隔10min),取平均值作為小鼠基礎痛閾即給藥前的正常痛閾值。
3、 給藥后痛閾值的測定:在服用鎮痛或麻醉藥物后,測量小鼠在熱盤上舔爪的平均時間,該時間對應的是小鼠服用藥物后對熱刺激的反應,作為給藥后痛閾值。若小鼠在熱板儀上60s內仍無痛覺反應,立即取出按60s計算并統計給藥前后的痛閾值。
4、痛閾提高的百分率:對兩組時間值的比較,評估鎮痛或麻醉藥物的效果。
計算方式:痛閾提高的百分率=[(給藥后的痛閾-基礎痛閾)/基礎痛閾]×100%。
【注意 】
1、用小鼠,痛閾反應時間超過60s應立即取出以免燙傷足部。
2、室溫以15℃左右為宜,過低反應遲鈍,過高則敏感。
3、鎮痛百分率大于50%時,才能認為有鎮痛效力。