大小鼠曠場實驗(Open Field Test)原理及步驟
瀏覽次數:154 發布日期:2025-6-10
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一、實驗原理
曠場實驗是一種經典的行為學測試方法,主要用于評估嚙齒類動物(大鼠/小鼠)的焦慮樣行為和探索行為。
其原理基于:
1.性與環境沖突:嚙齒類動物對新異環境具有天生的恐懼(傾向于躲避開放、明亮區域),同時具有探索新環境的本能。
2.焦慮與探索的權衡:焦慮水平高的動物會更多時間停留在邊緣區域(“安全區”),減少進入中央開放區域的探索行為;反之,低焦慮動物會更多探索中心區域。
3.運動活性:通過總移動距離和速度反映動物的活動水平,常用于評估藥物或應激對運動功能的影響。
二、實驗步驟
1.實驗前準備
設備:曠場裝置通常為正方形(大鼠:100×100 cm;小鼠:40×40 cm)或圓形場地,底部劃分網格或顏色分區,周圍有圍欄防止逃跑。部分裝置配備攝像頭和追蹤軟件(如EthoVision)。
環境控制:保持恒溫(22±1℃)、低光照(大鼠:約100 lux;小鼠:約50 lux),減少噪音干擾。
清潔:每次測試前用75%乙醇擦拭場地,避免氣味殘留影響后續測試。
2.適應與測試
適應期(可選):將動物置于測試間外靜置1-2小時,減少應激。
放置動物:將動物輕柔置于場地邊緣固定起始點(如角落),面向墻壁。
記錄參數:
1.總移動距離:反映運動活性。
2.中央區停留時間:中央區域占比(如大鼠中央20×20 cm區域)。
3.直立次數:(前爪抬起):探索行為的指標。
4.速度:運動活躍度。
5.首次進入中央區潛伏期:焦慮程度的敏感指標。
3. 數據分析
對比不同組別(如藥物處理組 vs. 對照組)的中央區停留時間、移動距離等差異。
三、注意事項
1.環境一致性:同一實驗中所有測試條件(光照、溫度、清潔劑)需嚴格統一。
2.動物狀態:
避免在動物飽食、哺乳期或疾病狀態下測試。
測試間隔至少24小時(多次測試時)。
3.人為干擾:測試者需遠離場地,避免噪音或動作干擾動物。
4.數據標準化:剔除異常數據(如跌倒、過度理毛導致的數據偏差)。
四、應用與變種
藥物篩選:評估抗焦慮藥(如BDZ類藥物)或精神興奮劑(如安非他命)的效果。
應激模型:結合慢性應激實驗,研究抑郁/焦慮行為。
變種:
帶威脅刺激的曠場(如頂部強光、電擊墊)增強焦慮誘導。
曠場結合其他測試(如高架十字迷宮)提高行為評估的效度。
五、常見問題
Q.:動物總在邊緣活動是否一定代表高焦慮?
A.:需結合其他指標(如直立次數、中央區進入次數)綜合判斷,邊緣活動也可能反映高警覺性而非焦慮。
Q:測試時長如何選擇?
A:常用5-30分鐘,一般5-10分鐘即可穩定反映行為差異,過長可能導致疲勞。