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檢測細(xì)胞增殖需要使用的儀器與試劑清單

瀏覽次數(shù):1500 發(fā)布日期:2020-6-15  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
許多小伙伴不知道自己檢測細(xì)胞增殖的時(shí)候究竟該檢測什么?使用哪些試劑?今天,百螢將總結(jié)的可以測量細(xì)胞增殖的方法、試劑、適用儀器等分享給大家。

細(xì)胞增殖可以通過測量諸如新合成的DNA、總核酸含量或細(xì)胞分裂等參數(shù)來確定(見表1)。 最簡單的方法是使用可與胺反應(yīng)的細(xì)胞跟蹤指示劑(例如CytoTell 染料)監(jiān)視細(xì)胞分裂,這些可滲透細(xì)胞的指示劑與細(xì)胞質(zhì)蛋白共價(jià)結(jié)合。由于這種共價(jià)偶聯(lián)反應(yīng),CytoTell 染料無法轉(zhuǎn)移到相鄰細(xì)胞中,并且可以在細(xì)胞中保留好幾代(最多可以觀察到9代)。隨著細(xì)胞分裂,CytoTell 染料在子細(xì)胞之間均等分布,并且每一代新細(xì)胞的熒光強(qiáng)度均是其親本的一半。可以使用標(biāo)準(zhǔn)的含甲醛固定劑和基于皂苷的透化緩沖液對(duì)用CytoTell 染料標(biāo)記的細(xì)胞進(jìn)行固定和透化,以進(jìn)行進(jìn)一步的細(xì)胞內(nèi)分析。

表1.用于檢測細(xì)胞增殖的試劑和檢測列表。

檢測類型 原理 試劑/測定 儀器

檢測細(xì)胞分裂

使用與細(xì)胞質(zhì)蛋白結(jié)合的可滲透細(xì)胞的染料。(隨著細(xì)胞分裂,染料被轉(zhuǎn)移到子細(xì)胞。新一代細(xì)胞的熒光強(qiáng)度是其親本的一半。)

CytoTell 染料

熒光酶標(biāo)儀,熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀

CytoTrace 染料

ReadiUse CFSE

檢測新合成的DNA

在細(xì)胞周期的S期將修飾的核苷酸摻入新合成的DNA中。一旦摻入,這些核苷類似物就可以用作細(xì)胞周期和增殖標(biāo)記物,可以使用標(biāo)記的探針進(jìn)行檢測以鑒定增殖細(xì)胞。

Bucculite dT摻入細(xì)胞增殖熒光成像試劑盒

熒光顯微鏡

BrdU  (需要酶或熒光團(tuán)標(biāo)記的抗BrdU抗體)

可適用于比色,熒光或化學(xué)發(fā)光儀器

檢測總核酸含量

使用可滲透細(xì)胞的核酸染色劑,該試劑能展現(xiàn)出與DNA質(zhì)量成比例的發(fā)射信號(hào)。然后對(duì)染色的群體進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析,以生成DNA直方圖,觀察細(xì)胞周期每個(gè)階段中細(xì)胞的百分比。

Cell Meter 熒光活細(xì)胞周期檢測

流式細(xì)胞儀

Cell Meter 熒光固定細(xì)胞周期檢測

核紫 LCS1 活細(xì)胞染料

Hoechst 33258,Hoechst 33342  和  DAPI


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