Kilobaser one/one-XT是世界上第一臺基于微流控芯片和試劑盒設計而成的微流控引物合成儀。它可用于生命科學基礎研究、基因工程或臨床診斷研究等領域?梢宰屇谧约旱膶嶒炇夜ぷ髋_上就可以快速合成引物(DNA/RNA寡核苷酸)。
Kilobaser微流控引物合成儀便攜式設計,尺寸為27x33x33厘米,適合任何實驗室工作臺,不占用太多空間。
合成速度快,每個堿基的循環時間僅為2.5分鐘,后處理時間為30-50分鐘,使用Kilobaser合成DNA和RNA寡核苷酸的速度比其他合成儀快6倍。
儀器采用獨特的試劑盒和基于微流控芯片的系統,與傳統的DNA合成儀不同,一次性微流控芯片形成了一個封閉的合成系統,不會發生任何液體泄漏,在合成過程中也可以防止污染。并且它被設計得盡可能用戶友好,操作界面直觀,即使是未經訓練的人員也能在短時間內使用該儀器完成DNA或RNA合成。
原理介紹
Kilobaser平臺對單個試劑容器加壓,并將試劑泵入我們的微流控芯片,在那里進行實際的合成。目前,我們所有的試劑盒都使用亞磷酰胺化學來合成寡核苷酸。Kilobaser的獨特之處在于兩項創新:
試劑盒系統,每個試劑盒都裝有合成所需的所有試劑。這樣,DNA和RNA的合成對每個生物學家來說都是輕而易舉的,無需任何培訓。
微流控芯片包含固相和液體試劑傳輸的閥門,合成的核苷酸鏈在固相上延伸。
微流控芯片
我們系統的核心是一個尺寸為76mm x 26mm的一次性微流控芯片。微流控芯片結合并小型化了傳統自動固相合成器的所有基本功能。傳統的臺式合成器使用管道、電磁流體閥和大柱來合成DNA寡核苷酸和RNA寡核苷酸。這些舊系統由于流體路徑較長,速度明顯較慢,并且由于死體積較大會產生大量廢物,而我們的專利微流體系統速度明顯更快,消耗的試劑也減少了50倍。
13個流體通道,孔徑幾乎和人的頭發一樣,將試劑從微流控芯片邊緣的入口引導到芯片中心的微流體閥。這些流體閥通過外部氣動壓力打開和關閉。一旦流體閥打開,試劑就會流入微柱。
微柱容納多孔材料(固相)以增加表面積——表面附著有連接分子,使第一個核苷酸與表面結合。一個接一個的核苷酸與生長中的DNA或RNA寡核苷酸連接,直到所需的序列合成完成并最終從固相中切割出來,可以合成300皮摩爾的序列。
試劑盒系統
由于我們的微流體系統大大減少了試劑消耗,我們能夠為DNA和RNA合成引入另一項創新:試劑盒。
一個試劑盒的尺寸僅為100mm x 60mm x 50mm,可以容納足夠的試劑(總體積為20mL),總共可以合成多達150個核苷酸,例如6個DNA引物,每個引物有25個堿基。每個試劑盒至少包含4個DNA或RNA堿基、8個輔助試劑或溶劑以及液體廢物容器。