方案摘要：金黃色葡萄球菌 Staphylococcus aureus，為革蘭氏陽性球菌，呈葡萄狀排列，無芽胞，無莢膜，能分解甘露醇，血漿凝固酶陽性。是革蘭氏陽性菌代表，為一種常見的食源性致病微生物。本方法利用Baird Parker平板培養的方法達到快速檢測牙膏中金黃色葡萄球菌的含量。
方案詳情：
一、實驗準備
1、儀器和設備
① 顯微鏡。
② 恒溫培養箱：36℃±1℃。
③ 離心機。
④恒溫水浴箱。
⑤ 試管：18 mm×150 mm。
⑥ 載玻片。
⑦ 酒精燈。
⑧ 三角瓶：250 mL。
⑨ 高壓滅菌器。
⑩ 手動移液器：fluidot  1 mL  MSP1K
⑪手動移液器：fluidot   10 mL  MSP10K
⑫ 無菌吸管：1 mL（具0.01 mL刻度）FDT-SP01001
⑬無菌吸管：10 mL（具0.1 mL刻度）FDT-SP01010
⑭手動移液器：fluidot  1 mL  MSP1K與 10 mL  MSP10K
⑮電動大容量助吸器：fluidot  0.1-100 mL
⑯吸頭：1.5mL   FDT-1500-1-TSF
⑰滅菌平皿：fluidot  FDT-9CM-2-S，直徑90 mm。
⑱蠕動泵分液器：fluidot  600D
 
2、培養基和試劑
① SCDLP 液體培養基
② 營養肉湯
③ 7.5%氯化鈉肉湯
④ Baird Parker平板
⑤ 血瓊脂平板
⑥ 甘露醇發酵培養基    
⑦ 滅菌液體石蠟
⑧ 兔（人）血漿制備
二、 實驗步驟
 
1、增菌：取1:10的檢液10 mL接種到90 mL SCDLP液體培養基中，事先需fluidot  600D蠕動泵分液器分裝90 mL SCDLP液體培養基置至三角燒瓶，36℃±1℃培養箱，培養24 h±2 h。
2、分離：自上述增菌培養液中，取1~2接種環，劃線接種到Baird Parker平板上，如無此培養基也可劃線接種到血瓊脂平板上，置36℃±1℃培養48 h±2 h。在血瓊脂平板上菌落呈金黃色，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。在Baird Parker平板培養基上為圓形，光滑，凸起，濕潤，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明帶。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的軟度。偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落，但無混濁帶及透明帶。挑取單個菌落分純在血瓊脂平板上，置36℃±1℃培養24 h±2 h。
3、染色鏡檢：挑取血瓊脂平板上分純后的菌落，涂片，進行革蘭氏染色，鏡檢。金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性菌，排列成葡萄狀，無芽胞，無莢膜，致病性葡萄球菌，菌體較小，直徑約為0.5 mm~1 mm。
4、甘露醇發酵試驗：取血瓊脂平板上分純后的菌落接種到甘露醇發酵培養基中，在培養基液面上加入高度為2 mm~3 mm的滅菌液體石蠟，置36℃±1℃培養24 h±2 h，金黃色葡萄球菌應能發酵甘露醇產酸。
5、血漿凝固酶試驗：吸取1:4新鮮血漿0.5 mL，置于滅菌小試管中，加入待檢菌24 h±2 h營養肉湯培養物0.5 mL，混勻，置36℃±1℃恒溫箱或恒溫水浴中，每半小時觀察一次，6 h之內如呈現凝塊即為陽性。同時將已知血漿凝固酶陽性和陰性菌株的營養肉湯培養物及營養肉湯培養基各0.5 mL，分別加入無菌1:4血漿0.5 mL，混勻，作為對照。也可使用商品化試劑，按照說明書操作，進行血漿凝固酶試驗。
6、如選擇生化鑒定試劑盒或微生物鑒定系統，可從營養瓊脂平板上挑取經純化的可疑菌落，用無菌稀釋液制備成濁度適當的菌懸液，使用生化鑒定試劑盒或微生物鑒定系統進行鑒定。
 
三、檢驗結果報告
被檢樣品經增菌分離培養后，平板上有可疑菌落生長，經染色鏡檢，證實為革蘭氏陽性葡萄球菌，并能發酵甘露醇產酸，血漿凝固酶試驗陽性者，可報告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。