圖3：R2的濃度依賴情況（A: Parallel line model; B: Slope-ratio model）

02

驗(yàn)證方案的適用性及特征參數(shù)

研究人員使用了60-140%活性濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，測試了此實(shí)驗(yàn)方案的linearity、accuracy、precision等參數(shù)，具體數(shù)據(jù)如表1。

表1：60-140%活性濃度的標(biāo)準(zhǔn)品測定得到的特征參數(shù)結(jié)果

       在文章中也提及了faricimab雙抗是由VEGF、Ang-2特異性抗體組成的，所以研究人員也分別用單型親本抗體進(jìn)行了特異性測試，也設(shè)置了不同的處理?xiàng)l件（例如pH、溫度），探究不同抗體的活性變化情況，結(jié)果見圖4。看圖可以發(fā)現(xiàn)單型親本抗體或同型對照相較參考品，均沒有信號(hào)響應(yīng)，而經(jīng)過處理后的抗體的活性則有不同程度的降低，即可充分證明此效價(jià)測定方案具有強(qiáng)特異性。

圖4：抗體在不同條件下的活性檢測情況

在此篇方法開發(fā)類文章中，我們看到了諸多流程示意圖及實(shí)驗(yàn)圖譜。研究人員搭建的效價(jià)測定方案中，采用了最佳的實(shí)驗(yàn)參數(shù)及數(shù)據(jù)分析模型。最終線性相關(guān)性R²=0.9997，準(zhǔn)確性97%，偏差2%。

相較傳統(tǒng)的終點(diǎn)檢測法（例如ELISA），Biacore在開展相關(guān)實(shí)驗(yàn)方案的制定時(shí)采用了在線測量方式，無需把實(shí)驗(yàn)分割成多步實(shí)驗(yàn)去完成，減少了可變量因素。同時(shí)，Biacore采用了label-free檢測方式，檢測信號(hào)與芯片表面質(zhì)量的變化呈正相關(guān)關(guān)系，所以無需對檢測樣本做預(yù)標(biāo)記處理，降低了實(shí)驗(yàn)復(fù)雜度及樣品消耗。

看完以上內(nèi)容，例如蛋白、多抗、核酸、多糖、病毒顆粒等，Biacore能助力相關(guān)的檢測方案建立，助力研發(fā)成果的轉(zhuǎn)化，加速藥物的上市進(jìn)度。大家如若對Biacore設(shè)備應(yīng)用進(jìn)展或?qū)��?shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)有特定的需求，歡迎隨時(shí)與我們聯(lián)系！