類風濕性關節炎（Rheumatoid arthritis，RA）是一種全身性的自身免疫性疾病,以炎癥細胞浸潤和滑膜細胞增生為特征。該疾病導致軟骨和骨骼損傷、關節畸形甚至殘疾，但現有治療藥物的毒性高、傳遞效率低，無法有效阻止其發展，因此仍以控制病情、減少致殘率和改善患者的生活質量為主。

鐵死亡是一種鐵依賴性的新型細胞程序性死亡方式。在腫瘤、RA等炎癥微環境中，過氧化氫(H₂O₂)富集，可通過Fe²⁺介導的費托反應催化生成高毒性的•OH。•OH誘導細胞內脂質過氧化，繼而損傷浸潤的炎癥細胞和增殖的成纖維細胞樣滑膜細胞，因此在RA治療中鐵死亡具有很大的研究潛力。

2023年12月來自江蘇大學藥學院及附屬醫院的研究團隊在《Materials Today Bio》上發表一種治療RA的新方法：用工程巨噬細胞作為載體，遞送Fe₃O₄和柳氮磺胺吡啶（sulfasalazine，SSZ），用于RA的鐵死亡和光熱療法。Fe₃O₄是一種磁性納米材料，可以通過外加磁場實現對巨噬細胞的定向操控。SSZ是一種常用的抗風濕藥物，具有抗炎和免疫調節作用。研究者利用巨噬細胞固有的炎癥趨化性和對納米顆粒的保護作用，將Fe₃O₄和SSZ有效運送到RA組織中，在近紅外光（NIR）照射下產生熱量，破壞巨噬細胞，釋放Fe₃O₄納米顆粒和SSZ，誘導細胞鐵死亡。鐵死亡和光熱效應有效地破壞了駐留的炎癥細胞和增殖的滑膜，對RA有明顯的治療作用（如Fig 1所示）。

文章中使用熒光染料FITC和DOX標記Fe₃O₄納米顆粒（NPs）與巨噬細胞共孵育，使用Orflo Technologies公司的快速流式細胞儀Moxi Go II，定量分析巨噬細胞對FITC標記Fe₃O₄的攝取時間和濃度摸索（Fig 2），在4h和40μg/mL為最佳孵育時間和濃度；定量分析DOX標記Fe₃O₄ NPs的細胞攝取情況（Fig 3）。結果顯示，DOX標記的Fe₃O₄ NPs在巨噬細胞中的攝取能力強于對游離DOX的攝取。

Fig 2. (c) Fe₃O₄-FITC孵育不同時間(0.5、1、2、4 h)后巨噬細胞的流式分析
(d) FITC濃度為10、20、40、80μg/mL時，Fe₃O₄-FITC孵育后巨噬細胞的流式分析

Fig 3 (a)培養4小時后，巨噬細胞內化游離DOX或Fe₃O₄-DOX NPs的流式檢測
(b)流式細胞術定量分析游離DOX和Fe₃O₄-DOX的平均熒光強度

綜上所述，本文開發了一種新的基于巨噬細胞的靶向納米顆粒遞送平臺，Fe₃O₄-SZZ能被巨噬細胞有效吸收，增加SZZ負載能力，為炎癥藥物遞送提供了一種策略，也證明了鐵死亡和光熱治療聯合治療在RA治療方面的巨大潛力。

Moxi GO II快速流式細胞儀，采用庫爾特原理進行細胞計數和粒徑測量，同時采用488nm激光光源，結合兩個PMT通道，525/45nm通道和561nm/LP（或者646nm/LP，可根據需要更換），進行細胞活率、細胞凋亡、轉染效率、活性氧簇、線粒體膜電位等常規流式檢測。儀器設計小巧輕便，無需預熱，開機即用，預設程序，觸屏操控，運行后10秒即可給出測試結果，使用后也無需清潔維護。無論是經驗豐富的流式專家，還是初試身手的實驗小白，Moxi Go II都可以助您輕松完成實驗。

美國Orflo Technologies公司是一家非常專業的細胞分析儀器研發和制造企業，擁有多項專利技術，產品以庫爾特原理的高精細胞計數儀和超快流式細胞儀為主。

環亞生物，生命科學產品全國性代理商，不斷把國外頂級的創新產品引入中國。環亞生物具備完善的公司運營、產品管理、營銷、售前技術支持和售后維修體系。作為Orflo Technologies中國地區獨家代理，環亞生物科技有限公司全權負責Orflo Technologies產品在中國地區的推廣、銷售，為廣大用戶提供專業的技術咨詢和產品服務。

文獻全文網頁鏈接：
https://doi.org/10.1016/j.mtbio.2023.100925


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