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熒光曲線:免疫熒光中樣本反應(yīng)時(shí)間對(duì)熒光曲線和結(jié)果的影響

瀏覽次數(shù):1571 發(fā)布日期:2023-5-5  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

免疫熒光中樣本反應(yīng)時(shí)間對(duì)熒光曲線和結(jié)果的影響
 

我們本次試驗(yàn)選取抗原類項(xiàng)目(貓瘟)、炎癥類項(xiàng)目(CRP)在不同展板時(shí)間時(shí)檢測(cè)的熒光曲線和結(jié)果,并對(duì)檢測(cè)的熒光曲線和結(jié)果進(jìn)行分析,進(jìn)而判斷反應(yīng)時(shí)間對(duì)熒光曲線和結(jié)果的影響。
 

試驗(yàn)一:

取來(lái)自同一只貓(貓瘟陽(yáng)性)的三個(gè)糞便樣本,糞便量依次從少到多,加入稀釋液中,進(jìn)行十次顛倒混勻后,靜置3min,靜置完成后,滴加4滴稀釋后的樣本液于加樣孔中,同時(shí)加入陰性對(duì)照組(加同等量的稀釋液),本次試驗(yàn)采用外部展板(快速檢測(cè))模式,分別取1-10分鐘的熒光曲線和檢測(cè)結(jié)果,觀察展板時(shí)間對(duì)熒光曲線和結(jié)果的影響。


從試驗(yàn)結(jié)果可以看出,在展板未充分時(shí),對(duì)于熒光曲線圖和結(jié)果會(huì)產(chǎn)生很大影響,可能會(huì)造成陰陽(yáng)性的誤判,當(dāng)展板充分后,檢測(cè)結(jié)果的重復(fù)性非常好,所以我們推薦使用內(nèi)部展板模式進(jìn)行檢測(cè)。
若檢測(cè)標(biāo)本為糞便或肛拭子,若加入的樣本量過多,會(huì)導(dǎo)致滴加樣本時(shí)的雜質(zhì)過多,造成展板時(shí)間過長(zhǎng)或展板不充分的問題,會(huì)報(bào)錯(cuò)“無(wú)效檢測(cè)卡”或出現(xiàn)異常曲線。因此我們?nèi)∵m量糞便或肛拭子樣本后,應(yīng)再混勻后進(jìn)行靜置,取上清液進(jìn)行檢測(cè)。


試驗(yàn)二:

取來(lái)自一只CRP檢測(cè)陽(yáng)性犬的血液樣本,將血液樣本顛倒混勻后,用一次性定量管取10uL血液,毛細(xì)管伸入稀釋液面以下,輕捏吸氣氣囊,來(lái)回清洗毛細(xì)管2-3次,清洗完成后,顛倒混勻樣本,取100uL樣本液于加樣孔中,同時(shí)加入陰性對(duì)照組(加100uL的稀釋液),本次試驗(yàn)采用外部展板(快速檢測(cè))模式,分別取1-3分鐘的熒光曲線和檢測(cè)結(jié)果,觀察展板時(shí)間對(duì)熒光曲線和結(jié)果的影響。


從試驗(yàn)結(jié)果可以看出,對(duì)于抗體或炎癥類的檢測(cè)項(xiàng)目,在展板不充分時(shí),也會(huì)對(duì)結(jié)果造成很大影響,從而影響我們對(duì)疾病的診斷。
從本次試驗(yàn)我們不難看出,我們的熒光檢測(cè)結(jié)果,不僅與動(dòng)物本身的疾病狀況有關(guān),也與我們檢測(cè)時(shí)加樣量的多少(糞便量過多導(dǎo)致展板異常)、展板時(shí)間(展板時(shí)間不足影響檢測(cè)結(jié)果)有密切關(guān)系。推薦大家選擇內(nèi)部展板模式進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)。

 

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