自實(shí)體組織分離是動(dòng)物細(xì)胞的主要來源，目前生物制藥領(lǐng)域應(yīng)用廣泛的細(xì)胞株如CHO細(xì)胞、293細(xì)胞、Vero細(xì)胞等最初均分離自不同動(dòng)物的組織器官。那如何最有效分離出想要的單細(xì)胞呢？無論是原代細(xì)胞獲取還是成熟細(xì)胞株的消化傳代，細(xì)胞消化都是關(guān)鍵的一環(huán)，今天逐典給大家整理一篇細(xì)胞消化大全，方便您更好的選擇適合自己實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)品。

細(xì)胞消化在不同領(lǐng)域的應(yīng)用

1. 原代細(xì)胞

直接從生物體獲取的組織更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)，且生物性狀尚未發(fā)生很大改變，因此在藥物篩選、細(xì)胞移植、類器官培養(yǎng)、腫瘤研究等眾多領(lǐng)域備受歡迎。針對(duì)不同組織采用不同的消化酶能使解離過程更加高效，酶解法也是主要的細(xì)胞解離方式，主要以胰蛋白酶為主，輔助添加其他蛋白酶增強(qiáng)活力。

2.細(xì)胞傳代

以單層生長(zhǎng)的細(xì)胞彼此之間以及與培養(yǎng)皿發(fā)生蛋白質(zhì)接觸，一般細(xì)胞長(zhǎng)至80%-90%密度需要傳代消化，貼壁細(xì)胞傳代前，需要把細(xì)胞用消化試劑從培養(yǎng)容器表面解離出來，細(xì)胞得以分離成單個(gè)懸液傳代至含新鮮培養(yǎng)基的新容器內(nèi)。消化方法以酶解法為主，胰蛋白酶是最常用的解離試劑。

圖2.不同培養(yǎng)規(guī)模的細(xì)胞傳代

通常的細(xì)胞消化策略：

• 小規(guī)模的細(xì)胞收集可使用吹打或細(xì)胞刮刀
• 形成蛋白緊密連接的，可采用胰蛋白酶
• 上皮細(xì)胞等可表達(dá)鈣粘蛋白的細(xì)胞，在酶消化基礎(chǔ)上需添加EDTA等螯合劑

為了保持細(xì)胞活力，消化反應(yīng)條件應(yīng)與細(xì)胞接觸的強(qiáng)度相匹配。

如果將反應(yīng)強(qiáng)度與細(xì)胞系的粘附特性相匹配，但細(xì)胞仍難以去除，則在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中可能存在抑制胰蛋白酶的元素，例如血清，可以通過在添加解離試劑之前用PBS簡(jiǎn)單地沖洗細(xì)胞一次或兩次來克服。此外，形成特別強(qiáng)的多層細(xì)胞融合也是需要注意的。
 

毫無疑問，胰蛋白酶作為原代細(xì)胞獲取、細(xì)胞傳代消化中必不可少的原料之一，在生物制藥工藝中也是重要的生產(chǎn)原輔料。應(yīng)用于生物制藥工藝意味著更高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，動(dòng)物來源、藥典要求、生產(chǎn)級(jí)別、批間穩(wěn)定性等都是胰蛋白酶產(chǎn)品的重要指標(biāo)！
 

逐典Trypelectase重組胰蛋白酶和Tryplus消化液作為專注細(xì)胞消化領(lǐng)域的胰酶產(chǎn)品，專門為工藝和生產(chǎn)設(shè)計(jì)。

Trypelectase非動(dòng)物源重組胰蛋白酶干粉產(chǎn)品，方便生產(chǎn)大規(guī)模配置，存儲(chǔ)、轉(zhuǎn)運(yùn)更方便。還有高穩(wěn)定性且即開即用的TrypLUS消化液，高封閉性滿足細(xì)胞消化領(lǐng)域的不同規(guī)模需求。