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生物反應器在利用T細胞規模化培養CAR-T細胞上的應用

瀏覽次數:1178 發布日期:2022-6-30  來源:蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
近年來,隨著生物科學技術的不斷發展,細胞療法逐漸成為熱門話題, CAR T療法屬于細胞療法的一種,它是通過基因改造,準確制導的方式來抑制或殺死腫瘤細胞。 CAR T 細胞規模化培養主要是利用生物反應器進行體外培養,生物反應器培養技術通過對細胞的生長環境(比如:溫度、營養物質、通氣量、產物、pH、機械要求和流速等)進行自動監測與調控,從而實現細胞規模化培養的生物技術過程。

什么是T細胞?T細胞培養的注意事項有哪些?
T細胞是人體免疫力的重要組成,它屬于淋巴細胞的一種,所以也被稱為T淋巴細胞。T細胞作為B細胞的輔助,在免疫系統中主要執行的是分化為效應細胞來執行細胞免疫的功能。

在 T 細胞的經過轉接后,可以起到抑制腫瘤細胞生長的作用。CAR T 細胞改造主要是通過從腫瘤活檢中分離 TIL,進行清洗和濃縮,然后再通過生物反應器進行倍數擴增。所以,CAR T 細胞療法是基于 T 細胞受體 (TCR) 或嵌合抗原受體 (CAR) 的生物工程技術。通過這種方法,來自其他癌癥患者的正常 T 細胞通過單采分離并轉導以產生 TCR 或 CAR T 細胞。

在這種方法中需要注意以下幾點:
1.必須執行激活程序以允許制造的T細胞的轉導和增殖。
T細胞激活和增殖的完整環境包括抗CD3抗體和外源性IL-2,以及作為培養細胞的外周血單核細胞。這種組合被也被稱為“快速擴展協議”(REP)。有些機構也在嘗試用額外的培養基補體(IL-7、IL-15、抗CD28抗體)以及使用專注于pp65蛋白的肽混合物進行預刺激,從而進一步提升T細胞的增殖率。
2. 用于有效治療的T細胞亞群尚未確定。
在CAR-T細胞療法中,由于CD4+和CD8+T細胞常常是混在一起進行基因編輯的,所以CD4+和CD8+可以同樣被激活,并且具有細胞裂解相關活性。由于T細胞活化涉及許多因素。T細胞亞群難以確定。所以,任何涉及活化步驟的生物反應器都應評估其對T細胞與抗原呈遞相互作用的影響。例如,生物反應器的攪拌速率,PO值、PH值等都會影響到T細胞活化。這就對細胞培養系統的標準化及各項參數都提出了更為嚴格的要求。



生物反應器進行規模擴增的優勢?
1.細胞擴增效率得以提升

生物反應器進行細胞培養主要目的在于:一方面是在單位體積內提升動物細胞的有效培養密度,從而達到細胞增產的效果,來生產蛋白、抗體或載體;另一方面還可以創造類似于體內環境的細胞增殖系統來培養稀缺的,增長緩慢的價值細胞。通過實踐,細胞生物反應器大規模細胞擴增的主要方式有貼壁培養、片狀載體培養和全懸浮培養。與搖瓶培養相比,生物反應器在細胞的擴增速度、細胞群的穩定性、細胞成活率等方面都有著明顯的優勢。目前已廣泛用于創新藥研發、基因藥物生產等領域。
2.可以節約生產成本和保證細胞質量
由于細胞生物反應器可以提供細胞培養的穩定環境,通過PID微電子控制系統,全程自動監控影響細胞生長的各項因素,并及時生成數據化分析報告反饋并調整。
3.促進符合良好生產規范(GMP)的協議
由于當前T細胞擴增方案屬于高勞動強度,所以促進確保GMP的過程非常重要。生物反應器通過自動化及密閉設計從本質上避免了細胞群在擴增期間暴露于外部環境所造成的污染,這樣的自動化、過程控制和完整的封閉系統也滿足和促進了GMP規范要求,培養系統采用電子簽名,均符合GMP審核要求。

蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司13年專注于生物反應器,發酵罐、PCR儀、凝膠成像、移液器等實驗室儀器設備供應,生物反應器采用進口零部件,三重防污染密封設計工藝,有2L/5L/15L/75L/150L/200L等多種規格可以供選擇,另外支持特殊定制已適應不同類型的客戶,具有價廉質優、售后有保障基本實現了進口生物反應的國產化替代。
發布者:蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
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標簽: T細胞培養
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