抑郁模型的社會行為評價與慢性應(yīng)激動物模型的建立
慢性束縛是抑郁癥常用的應(yīng)激模型，可操作性強，重復(fù)性好，可以模擬抑郁癥的核心癥狀——缺乏興趣。本研究從社會應(yīng)激的角度出發(fā)，加入了孤養(yǎng)的應(yīng)激方法，使模型更符合抑郁癥發(fā)病的理論基礎(chǔ)。糖水偏好實驗是評價興趣缺失的經(jīng)典實驗。本研究結(jié)果顯示，慢性束縛模型組糖水偏愛指數(shù)下降，與正常組相比有顯著性差異，說明抑郁模型成功。
社交回避試驗是一種可操作性很強的嚙齒動物社交行為評價方法。經(jīng)典的方法是三箱社交回避測試。長方形的盒子被兩塊擋板分成三個盒子，盒子上有門，供動物自由穿梭。該實驗允許受試動物做出接近或逃避的選擇來刺激小鼠，具有較高的靈敏度。動物自由適應(yīng)三個盒子的環(huán)境后，在兩端的每個盒子里放一個鼠籠，其中一個盒子里裝刺激老鼠，另一個是空的鼠籠。將受試動物放在中間的箱子里，打開兩邊的門，收集動物接觸受刺激小鼠和空鼠籠的時間、頻率和潛伏期，以及動物在兩端箱子里的運動距離、時間和進入頻率，并據(jù)此描述動物的社會偏好行為。動物行為軌跡分析軟件采用頭-體-尾三點跟蹤法，其精度與攝像頭與被測動物的距離有關(guān)。距離越短，跟蹤越精確。這項研究是基于三箱法，有一些變化。兩個鼠籠放在一個方形盒子的對角，方形盒子的長度是三個盒子結(jié)構(gòu)的1 /2，這樣可以降低攝像頭的高度，動物行為軌跡分析軟件可以更精確地跟蹤動物的頭、身、尾三個點。
測試方法
將動物隨機分為正常組和慢性束縛加孤養(yǎng)組，每組10只。在模型組，動物被飼養(yǎng)在一個籠子里。關(guān)于長期約束的方法，請參考參考文獻。將動物置于50毫升離心管中(在離心管上燒幾十個直徑為2毫米的孔以通氣)，每天束縛4小時(10: 00 ~ 14: 00)，共35天。A組:每籠5只正常動物，置于另一個房間，無任何干預(yù)。造模后進行糖水偏好試驗和社交回避實驗。
動物行為分析軟件
VisuTrack動物行為跟蹤軟件（上海欣軟，中國）自動實時跟蹤動物的軌跡數(shù)據(jù)，計算動物在箱體內(nèi)的活動情況和接觸行為。
糖水偏愛測試
根據(jù)文獻報道，糖水偏好測試方法分為訓(xùn)練期和測試期。在訓(xùn)練期間，動物在最初的24小時內(nèi)被給予兩瓶1%蔗糖水、一瓶1%蔗糖水和一瓶純水。測試前不禁食不喝水。在測試期間，動物還被給予一瓶1%的蔗糖水和一瓶純水15小時。為了避免位置偏好的影響因素，在測試中間，交換兩個瓶子的位置。測試結(jié)束后，計算糖水喜好指數(shù)(糖水喜好指數(shù)=糖水消耗量/總液體消耗量× 100%)。
社交回避實驗
動物適應(yīng)試驗室1小時后，進行社交回避實驗。根據(jù)文獻記載，首先將動物置于50 × 50 × 50 cm的方形開口箱中，自由適應(yīng)5 min。測試時，在敞開的箱子的一個角落里放一個空的鼠籠，在對面的角落里放一個同樣的鼠籠，在鼠籠里放一個陌生人。籠子上有圓孔，實驗小鼠和刺激小鼠可以通過氣味接觸。將實驗大鼠置于開口箱中，用VisuTrack行為追蹤系統(tǒng)記錄實驗大鼠在10分鐘內(nèi)接觸空籠和刺激籠的時間和頻率，以及首次接觸籠的潛伏期。實驗結(jié)束，取出實驗小鼠，放入籠子。偏好指數(shù)=實驗大鼠暴露于刺激籠子的時間/暴露于空籠子的時間。接觸行為為主動嗅聞，定義為實驗小鼠鼻尖與籠子的距離在2 cm以內(nèi)。
總結(jié)
鑒于抑郁癥臨床表現(xiàn)的多樣性，應(yīng)激抑郁動物模型的行為學(xué)評價也逐漸趨于多樣化，結(jié)合經(jīng)典評價方法形成了二維評價體系。社會能力，尤其是社交能力，在應(yīng)激抑郁動物模型的行為評價中備受關(guān)注，社交回避實驗在應(yīng)激抑郁模型的行為評價中可能具有與強迫游泳和懸尾實驗同樣重要的價值。研究表明，社交回避實驗和懸尾實驗有很好的相關(guān)性。另一方面，丙咪嗪、地昔帕明等抗抑郁藥能明顯改善動物模型的社會能力，提示其具有良好的預(yù)測效度。本研究將環(huán)境應(yīng)激和社會應(yīng)激因素相結(jié)合，建立慢性束縛和孤兒養(yǎng)育模型，觀察社會回避實驗對社會行為的影響。結(jié)果表明，慢性束縛模型組受刺激小鼠的探索時間和次數(shù)明顯減少，探索潛伏期明顯延長，社會偏好指數(shù)明顯下降，表現(xiàn)出一定程度的社會回避。這與Van等人報道的結(jié)果一致，即簡單的慢性束縛可以導(dǎo)致小鼠的社交回避。
如果您也對動物實驗感興趣，我們的公眾號：bioviewer，動物神經(jīng)科學(xué)與行為學(xué)專注于動物神經(jīng)科學(xué)與行為學(xué)的實驗知識的方法傳播與分享交流，您可以推薦給您身邊的朋友、同學(xué)以及老師，我們會定期更新您需要的相關(guān)實驗方法的視頻和文章，希望能對大家?guī)韼椭?/span>
社交回避試驗是一種可操作性很強的嚙齒動物社交行為評價方法。經(jīng)典的方法是三箱社交回避測試。長方形的盒子被兩塊擋板分成三個盒子，盒子上有門，供動物自由穿梭。該實驗允許受試動物做出接近或逃避的選擇來刺激小鼠，具有較高的靈敏度。動物自由適應(yīng)三個盒子的環(huán)境后，在兩端的每個盒子里放一個鼠籠，其中一個盒子里裝刺激老鼠，另一個是空的鼠籠。將受試動物放在中間的箱子里，打開兩邊的門，收集動物接觸受刺激小鼠和空鼠籠的時間、頻率和潛伏期，以及動物在兩端箱子里的運動距離、時間和進入頻率，并據(jù)此描述動物的社會偏好行為。動物行為軌跡分析軟件采用頭-體-尾三點跟蹤法，其精度與攝像頭與被測動物的距離有關(guān)。距離越短，跟蹤越精確。這項研究是基于三箱法，有一些變化。兩個鼠籠放在一個方形盒子的對角，方形盒子的長度是三個盒子結(jié)構(gòu)的1 /2，這樣可以降低攝像頭的高度，動物行為軌跡分析軟件可以更精確地跟蹤動物的頭、身、尾三個點。
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動物行為分析軟件
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糖水偏愛測試
根據(jù)文獻報道，糖水偏好測試方法分為訓(xùn)練期和測試期。在訓(xùn)練期間，動物在最初的24小時內(nèi)被給予兩瓶1%蔗糖水、一瓶1%蔗糖水和一瓶純水。測試前不禁食不喝水。在測試期間，動物還被給予一瓶1%的蔗糖水和一瓶純水15小時。為了避免位置偏好的影響因素，在測試中間，交換兩個瓶子的位置。測試結(jié)束后，計算糖水喜好指數(shù)(糖水喜好指數(shù)=糖水消耗量/總液體消耗量× 100%)。
社交回避實驗
動物適應(yīng)試驗室1小時后，進行社交回避實驗。根據(jù)文獻記載，首先將動物置于50 × 50 × 50 cm的方形開口箱中，自由適應(yīng)5 min。測試時，在敞開的箱子的一個角落里放一個空的鼠籠，在對面的角落里放一個同樣的鼠籠，在鼠籠里放一個陌生人。籠子上有圓孔，實驗小鼠和刺激小鼠可以通過氣味接觸。將實驗大鼠置于開口箱中，用VisuTrack行為追蹤系統(tǒng)記錄實驗大鼠在10分鐘內(nèi)接觸空籠和刺激籠的時間和頻率，以及首次接觸籠的潛伏期。實驗結(jié)束，取出實驗小鼠，放入籠子。偏好指數(shù)=實驗大鼠暴露于刺激籠子的時間/暴露于空籠子的時間。接觸行為為主動嗅聞，定義為實驗小鼠鼻尖與籠子的距離在2 cm以內(nèi)。
總結(jié)
鑒于抑郁癥臨床表現(xiàn)的多樣性，應(yīng)激抑郁動物模型的行為學(xué)評價也逐漸趨于多樣化，結(jié)合經(jīng)典評價方法形成了二維評價體系。社會能力，尤其是社交能力，在應(yīng)激抑郁動物模型的行為評價中備受關(guān)注，社交回避實驗在應(yīng)激抑郁模型的行為評價中可能具有與強迫游泳和懸尾實驗同樣重要的價值。研究表明，社交回避實驗和懸尾實驗有很好的相關(guān)性。另一方面，丙咪嗪、地昔帕明等抗抑郁藥能明顯改善動物模型的社會能力，提示其具有良好的預(yù)測效度。本研究將環(huán)境應(yīng)激和社會應(yīng)激因素相結(jié)合，建立慢性束縛和孤兒養(yǎng)育模型，觀察社會回避實驗對社會行為的影響。結(jié)果表明，慢性束縛模型組受刺激小鼠的探索時間和次數(shù)明顯減少，探索潛伏期明顯延長，社會偏好指數(shù)明顯下降，表現(xiàn)出一定程度的社會回避。這與Van等人報道的結(jié)果一致，即簡單的慢性束縛可以導(dǎo)致小鼠的社交回避。
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