紅曲粉中桔青霉素的測定方法
紅曲粉，是一種天然紅色素，它在食品工業(yè)中應(yīng)用十分廣泛，南方做燒肉或豆腐乳多使用。紅曲是用糯米蒸制后接種紅曲菌種，發(fā)酵繁殖的，產(chǎn)品是發(fā)酵后的暗紅色糯米，經(jīng)粉碎后成為紅曲粉。
紅曲粉易受潮，一旦受潮，就會逐漸霉變，紅曲霉畢竟是霉菌，它產(chǎn)生的代謝物遠(yuǎn)不止紅曲色素一種，極易產(chǎn)生桔青霉素。
很早以前就有人發(fā)現(xiàn)紅曲有抑菌能力，大約在20年前，法國科學(xué)家鑒定出了紅曲霉產(chǎn)生的桔青霉素，后來又發(fā)現(xiàn)很多紅曲霉都會產(chǎn)生這種物質(zhì)。
桔青霉素是一種真菌毒素，雖然其毒性比huang曲霉素遜色不少，但仍然可能具有腎臟毒性和致癌、致畸作用。2017年10月27日，世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機構(gòu)公布的致癌物清單初步整理參考，桔霉素在3類致癌物清單中。
隨后，日本、美國、歐盟等國家和地區(qū)開始限制中國紅曲產(chǎn)品的出口。
后來中國食品工業(yè)界開始篩選不產(chǎn)生桔青霉素的優(yōu)秀紅曲霉菌種，同時通過改進生產(chǎn)工藝減少桔青霉素的產(chǎn)生。
目前已經(jīng)基本解決了這個歷史遺留問題，中國的國家標(biāo)準(zhǔn)也對紅曲色素中的桔青霉素作出了限量規(guī)定。固態(tài)樣品桔霉素限定值為1mg/kg，液態(tài)樣品桔霉素限定值為50ug/L。
檢測方法參考國家標(biāo)準(zhǔn)GB5009.222-2016
以下物品用于測定樣品中的桔青霉素(HPLC-熒光法)
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序號 |
貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
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1 |
IAC109 |
clover桔青霉素親和柱,1ml,25支/盒 |
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2 |
桔青霉素固體標(biāo)準(zhǔn)品 1mg | |
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3 |
桔青霉素液體標(biāo)準(zhǔn)品 1ml | |
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4 |
G1112C |
Clover 10倍濃度0.1%PBS緩沖液，150ml/瓶 |
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5 |
G1113C |
Clover 10倍濃度PBS緩沖液，150ml/瓶 |
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6 |
31955C |
Clover 玻璃纖維濾紙，100張/盒 |
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7 |
31240C |
Clover 折疊式槽紋濾紙，100張/盒 |
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8 |
31967 |
試管擦拭紙，280張/盒 |
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9 |
C546150-U |
ODS C18 色譜柱，4.6*150mm，5um |
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10 |
34000C |
Clover無熒光測試管，250支/包，長75mm |
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11 |
34010 |
10ML玻璃注射器筒(定量管毒素專用） |
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12 |
36020 |
塑料漏斗10個/包 |
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13 |
ZJ0612 |
Clover 12位泵流操作架一套 |
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14 |
20202 |
1.1升不銹鋼均質(zhì)杯均質(zhì)器，22000轉(zhuǎn)/min，帶定時功能 |
檢測原理
將樣品與提取液混合、勻漿、過濾，然后將濾液過CitriTestTM HPLC柱科樂福clover桔青霉素親和柱（貨號IAC109），柱內(nèi)含桔青霉素的特異性抗體。隨即，桔青霉素將鍵合在分離柱中的抗體上。然后通過淋洗，去除免疫親合柱上的雜質(zhì)。隨后使用洗脫液過柱，將桔青霉素從抗體上分離下來。從柱中流出的洗脫液隨即注入HPLC系統(tǒng)進行檢測分析。
主要優(yōu)點
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專屬--專門用于HPLC，UPLC或MS-HPLC
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穩(wěn)定--保質(zhì)期長，18個月
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快速--處理一個樣品約20分鐘
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范圍--10-500ppb
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應(yīng)用--紅曲及其制品，玉米，大米，辣椒等
桔青霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液(100ng/mL)的液相色譜圖
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