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三種間充質(zhì)干細胞鑒定方法的介紹與比較

瀏覽次數(shù):2108 發(fā)布日期:2021-7-22  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負

間充質(zhì)干細胞(MSC)是屬于中胚層的一類多能干細胞,最初在骨髓中被發(fā)現(xiàn),自此進入科研學者的視線。MSC來源豐富,可從骨髓、脂肪、牙髓、胎盤、臍帶、肝等許多組織中提取獲得,經(jīng)過連續(xù)多代的培養(yǎng),仍然能保持高度的增殖和分化潛能,而且免疫原性比較低,基本不存在免疫排斥反應(yīng),臨床使用中不需要配型。因具有許多得天獨厚的優(yōu)勢,MSC現(xiàn)已成為干細胞研究領(lǐng)域中的人氣明星。

但是,你知道什么樣的細胞才是MSC嗎?又該如何為MSC鑒定身份呢?其實,我們可以通過形態(tài)學鑒定,表面標志物鑒定和多向分化潛能鑒定這三種方法來為MSC驗明正身。

01  形態(tài)學鑒定
MSC多數(shù)呈纖維細胞樣生長,在支持物表面呈梭形或不規(guī)則三角形,細胞中央有卵圓形核,胞質(zhì)向外伸出長短不同的突起。傳代后細胞呈均質(zhì)、旋渦狀排列。幾乎所有的MSC都是貼壁生長,具有較強的貼壁能力。
 


02  表面標志物鑒定
MSC的細胞表面標志物鑒定常采用流式細胞儀來進行。MSC屬混雜細胞群,其表面抗原也具有非專一性, 它可同時表達間質(zhì)細胞、內(nèi)皮細胞和表皮細胞的表面標志,如粘附因子、生長因子和細胞因子受體以及整合素家族等。

MSC的細胞表面標志物鑒定標準為:
① CD105、CD73和CD90陽性率≥90%;
② CD45、CD34、CD14或CD11b、CD79α或CD19、HLA-DR呈陰性,陽性率≤5%。

不同組織來源的MSC可共享相同的細胞表面標記,如CD29和CD44。

03  多向分化潛能鑒定
MSC具有在體外分化為成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、肝細胞等定向分化的能力,所以鑒定MSC的多向分化潛能也是重要的鑒定方法之一。MSC成骨誘導分化最常用的染色方法是茜素紅染色法,成脂誘導分化最常用的染色方法是油紅O染色法,而成軟骨誘導分化最常用的方法是阿利辛藍染色、懸浮培養(yǎng)。
 

以上就是MSC三種常用鑒定方法,你都學會了嗎?
 

發(fā)布者:賽業(yè)(蘇州)生物科技有限公司
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