使用切向流過濾進行胞外囊泡的濃縮和洗濾

瀏覽次數：2009　發布日期：2021-3-16　來源：本站　僅供參考，謝絕轉載，否則責任自負

來自瑞典KTH皇家理工學院等的研究人員在2021年1月份的《bioRxiv》雜志發表了題為“Multiparametric Profiling of Single Nanoscale Extracellular Vesicles by Combined Atomic Force and Fluorescence Microscopy: Correlation and Heterogeneity in Their Molecular and Biophysical Features”的文章。研究中，使用膜表面積370cm2、MWCO 300 kD的MidiKros® 中空纖維過濾器組件對制備的胞外囊泡（EV）進行濃縮和洗濾。

摘要：作為細胞間通信的關鍵參與者，納米級細胞外囊泡(EV)為診斷和治療提供了獨特的機會。然而，由于其在分子和物理特性上的高度異質性，其細胞起源和功能特性仍然難以確定。本文首次結合利用熒光和原子力顯微鏡，研究了單個小EV (sEV)的膜蛋白組成、大小和機械特性等多個EV參數。此外，還研究了它們在不同細胞源中的相關性和異質性。本研究針對來自人胚胎腎293、臍血間充質基質和人急性單核細胞白血病細胞系的sEV進行了研究，鑒定出常見的和細胞系特異性的sEV亞群，這些亞群具有不同的常見四跨膜蛋白(CD9、CD63和CD81)分布和生物物理特性。雖然各個sEV的四跨膜蛋白豐度與其大小無關，但CD9和CD63的表達水平有很強的相關性。然而，在所有的細胞系中也發現了一個具有較高豐度共表達所有三種四跨膜蛋白的sEV群體，其平均直徑<100 nm，楊氏模量相對較低。這種多參數方法有望為EV生物學和功能提供新的見解，潛在地破解該領域尚未解決的問題。

原文：S.Cavallaro, F.Pevere, F.Stridfeldt, et al., Multiparametric Profiling of Single Nanoscale Extracellular Vesicles by Combined Atomic Force and Fluorescence Microscopy: Correlation and Heterogeneity in Their Molecular and Biophysical Features. bioRxiv, 2021, doi: https://doi.org/10.1101/2021.01.22.427773.