葉綠素測定儀采用光電無損檢測方法測量葉綠素相對含量：基于葉綠素吸收波長為650nm的紅光,但并不吸收波長為940nm的紅外光,紅外光的發射和接收主要是為了消除葉片厚度等對測量結果的影響。紅光到達葉片后,部分被葉片的葉綠素所吸收,少量被反射后,剩下透過葉片被接sho器轉換成為相應的電信號,然后通過A/D轉換器轉換為數字信號,微處理器利用這些數字信號計算葉綠素的相對含量,表示為SPAD值,顯示并存儲。
怎樣正確的使用：
1、 測定儀的測量面積僅為2mm/跨度>3mm,可用于測量相對較小的葉片。樣品的厚度可以達到1.2mm的中心。顯示測量區域的中心線。用手指按壓手指夾，直到葉綠素計滴落，測量結果顯示在屏幕上。測量值自動存儲在內存中。
2、 當葉綠素計直接在太陽下使用時，人體被用來遮擋陽光，這樣測量結果就不會受到影響。
3、不要試圖測量厚的部分，如靜脈。如果在測量的葉片中有很多靜脈，較好的方法是進行多次測量并得到水平值。如果在當前屏幕上出現一系列“滴“聲和“---“閃光，則是測量步驟樣本剪輯執行錯誤，未完全密封，在測量未完成前未將樣本包含打開，或樣本太厚或太小。
4、如果小數點閃爍、小數點或測量值大于50,則不能保證測量精度。如果樣品夾的發射或接收窗口臟了或有水，將不會有準確的測量結果。測量前請檢查樣品夾窗口是否清潔。
測量時又應注意什么事項：
1. 一般來說我們常常利用手持葉綠素測定儀來測定植物的葉綠素含量，并以此判斷植物的氮元素含量，但是在測算的過程中，確定SPAD臨界值是十分關鍵的，而由于同一生長條件下不同品種間SPAD值存在較大差異，因此針對于不同的品種，要建立不同的SPAD臨界值，這樣以來利用手持葉綠素測定儀測算的氮元素含量才有可能是準確的。
2. 在使用手持葉綠素測定儀測定的過程中，如果選用的葉位不同，那么可能得到的測定結果也不同，因此為了得到具有代表性的測定結果，首先應該要同意所選的葉位，一般來說，植株的頂部的幾片葉片受土壤中的氮元素含量的影響比較的小，所以在使用進行手持葉綠素測定儀測量的過程中可以選用頂部的那幾片葉子。
3. 就同一片葉片而言，其不同的位置測得的SPAD值也是不同的，比如說玉米在葉片中部距基部55%的位置測定結果偏差小，而在40%～60%區域內測定值變異系數比較低。因此在使用手持葉綠素測定儀測定的過程中，還需要注意測量方位的選擇，以避免測定誤差。