填料做為色譜技術的核心，一直是色譜研究中最豐富、最有活力、最富于創造性的研究方向之一。經常使用色譜柱的您知道硅膠鍵是如何相互作用的嗎？

要搞明白這個問題，我們要先明白色譜柱的結構。
 

 

結構
 

色譜柱由接頭、螺帽、柱管、填料、墊圈及過濾片等組成，其中填料為色譜柱的核心部分，科研工作者在填料上發揮奇思妙想，開發出市面上種類繁多的色譜柱，每種色譜柱又有其獨特的選擇性及應用。

 

常用的色譜柱填料基質為硅膠，硅膠作為基質有如下優點：
 

硅膠填料通式

根據 R3 基團的不同，可將色譜柱分為不同的類型。 
 

B：二官能團鍵合：增加載樣量及方法穩定性
 

1、空間位阻

普通的色譜柱在 pH ＜2 時不穩定，發生水解，導致鍵合相流失。當我們用異丙基、二異丁基來取代甲基的話，就在鍵合相上形成一個保護層，這樣不僅能抗水解能力（pH1-8），還能防止分離化合物與硅羥基之間的作用，改善峰型。
 

 

2、極性嵌入

在碳鏈上鍵合了極性基團，流動相在該基團處形成了水「屏蔽」層媒介，水層間接屏蔽了帶負電的硅羥基與目標分離物接觸可能性，減少與酸、強堿性化合物的吸附，減少了拖尾現象的產生，大大地改善了色譜峰型對稱性。
 

 

另外，極性嵌入可降低「脫水」（ 疏水塌陷）危險，即使在含水量高的流動相條件下，樣品也同樣有穩定保留和最佳峰形。
 

疏水塌陷：普通的 HPLC 色譜柱在有機溶劑含量低甚至 100% 水流動相條件下，一旦流速停止，推動水溶液流動相進入硅膠孔隙的壓力減小，當壓力降低時，疏水的微孔表面排斥極性流動相，便會發生鍵合相孔隙脫水，從而導致所謂的「疏水塌陷」，對化合物的保留能力大大減弱。  

 

 

3、雙層表面修飾

在硅膠新增加表面層硅羥基活性更低的新硅羥基 pH5.2（普通硅羥基 pH 約為 3.5），低表面硅羥基活性，抑制二次保留 。
 

 

 

核殼型色譜柱對儀器的柱外死體積要求高、且柱容量小于全多孔色譜填料，因而并不適用于大規模的制備液相分離需求。