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人胚肺二倍體細胞操作步驟

瀏覽次數(shù):1108 發(fā)布日期:2019-12-26  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負
人胚肺二倍體細胞 英文名稱:CCC-HPF-1 細胞 Cell定義:能進行獨立繁殖的有膜包圍的生物體的基本結(jié)構(gòu)和功能單位。一般由質(zhì)膜、 細胞 質(zhì)和核(或擬核)構(gòu)成,是生命活動的基本單位。
人胚肺二倍體細胞操作步驟
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
發(fā)布者:上海研生實業(yè)有限公司
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