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q225熒光定量PCR儀高級(jí)熱循環(huán)設(shè)置功能詳解-Advanced Cycling

瀏覽次數(shù):3621 發(fā)布日期:2019-12-5  來(lái)源:酷搏科技
      酷搏科技Quantagene q225熒光定量PCR儀配備了許多實(shí)用的功能。今天要給大家詳細(xì)講一講高級(jí)熱循環(huán)設(shè)置(Advanced Cycling)功能的使用方法。
 
      q225默認(rèn)的熱循環(huán)程序模板,支持最多6個(gè)步驟和100個(gè)循環(huán),足夠滿足絕大部分用戶的使用需求。但是一些應(yīng)用中,可能需要前幾個(gè)循環(huán)設(shè)置不同的反應(yīng)條件,例如樣本為gDNA時(shí)升高前幾個(gè)循環(huán)的解鏈溫度,或?yàn)樘岣邤U(kuò)增特異性而升高前幾個(gè)循環(huán)的退火溫度等。這時(shí)候可以使用q225軟件中的高級(jí)熱循環(huán)設(shè)置功能
 
      后文的設(shè)置說(shuō)明將以如下熱循環(huán)程序?yàn)槔旱?-5個(gè)循環(huán):98 ℃ 10s,65 ℃ 30s;
第6-40個(gè)循環(huán):95 ℃ 5s,60 ℃ 15s。
 
第一步 啟動(dòng)高級(jí)熱循環(huán)設(shè)置功能
在q225操作軟件菜單中選擇
溫度配置—》高級(jí)熱循環(huán)設(shè)置
打開后彈出高級(jí)熱循環(huán)設(shè)置對(duì)話框
勾選啟用高級(jí)熱循環(huán)設(shè)置
 
第二步 設(shè)置第1組循環(huán)
在左側(cè)的編輯區(qū)域輸入第1組循環(huán),例如:
循環(huán)步驟數(shù)為2;
第一步解鏈:98 ℃ 10s;
第二步退火+延伸:65 ℃ 30s;
循環(huán)數(shù)為5;
在第2步采集熒光信號(hào)。
完成后點(diǎn)擊應(yīng)用
 
第3步 加入第2組循環(huán)
單擊 插入 按鈕,增加一組新的循環(huán)
在左側(cè)的編輯區(qū)域輸入第2組循環(huán):
循環(huán)步驟數(shù)為2;
第一步解鏈:95 ℃ 5s;
第二步退火+延伸:60 ℃ 15s;
循環(huán)數(shù)為35;
在第2步采集熒光信號(hào)。
完成后點(diǎn)擊應(yīng)用
 
第4步 查看和編輯
在右側(cè)的表格中可以看到每一組熱循環(huán)的詳細(xì)配置
通過(guò)單擊左側(cè)的 插入 刪除 按鈕,來(lái)新增和刪除組
通過(guò)單擊右側(cè)表格,或者單擊左側(cè)組名兩邊的箭頭,來(lái)切換當(dāng)前編輯的溫度組。
編輯完成后不要忘記點(diǎn)擊 應(yīng)用 按鈕 使得更改生效哈
完成全部設(shè)置后,點(diǎn)擊 確認(rèn) 按鈕

第5步 開始實(shí)驗(yàn)
返回主界面,可以看到原本設(shè)置循環(huán)溫度和時(shí)間的區(qū)域,已經(jīng)提示啟用了高級(jí)熱循環(huán)設(shè)置。
接下來(lái)就可以正常開始實(shí)驗(yàn)啦~
 
高級(jí)熱循環(huán)功能
  • 最多支持10組循環(huán)
  • 每組循環(huán)支持最多6個(gè)步驟,循環(huán)數(shù)最多100
  • 即總共支持最多1000個(gè)循環(huán)
 
另一種選擇
如果在40個(gè)循環(huán)前,想要額外增加3個(gè)循環(huán)進(jìn)行預(yù)擴(kuò)增,預(yù)擴(kuò)增階段的溫度設(shè)置與循環(huán)階段的溫度設(shè)置不同,且預(yù)擴(kuò)增階段不采集熒光(不參與Ct值計(jì)算)。
此時(shí)可以考慮在循環(huán)前步驟中開啟循環(huán)功能
勾選 循環(huán)前 框中的 開啟循環(huán) 選項(xiàng)
 
例如需要設(shè)置的溫度參數(shù)為
熱激活:95 ℃ 60s;
預(yù)擴(kuò)增循環(huán):3個(gè)循環(huán),不采集熒光信號(hào),98 ℃ 20s,65 ℃ 30s;
擴(kuò)增循環(huán):40個(gè)循環(huán),95 ℃ 5s,60 ℃ 15s, 采集熒光。
則按照上圖進(jìn)行設(shè)置,在開啟循環(huán)下方,設(shè)置循環(huán)步驟為2-3,共3循環(huán)。

上述兩個(gè)功能默認(rèn)不開啟,如有需要請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)支持為您開啟。

本期高級(jí)熱循環(huán)設(shè)置功能就為您介紹到這里。
如果您還需要何種功能的介紹,或者使用中有任何意見和建議,歡迎留言或者聯(lián)系酷搏科技技術(shù)支持support@kubotechnology.com

北京酷搏科技有限公司
電話:010-82839099
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技術(shù)支持:support@kubotechnology.com
 
發(fā)布者:北京酷搏科技有限公司
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