Azure總蛋白儀與內參的可靠性比較
瀏覽次數:2816 發布日期:2019-10-21
來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
目前,多個主流期刊和免疫印跡專家提出了看家基因已經不適合作為內參使用了。因為大多數看家基因都是高豐度蛋白,其產生的信號大多都會接近線性動態范圍的上限,當我們在檢測低豐度蛋白的時候,往往蛋白的上樣量會很大,易造成信號過飽和,這時候常見的內參產生的信號已經不能正確反應上樣量的差異了。并且研究發現一些看家基因的表達并不是恒定的,它會隨著發育階段的不同等因素產生變化,所以使用看家基因的定量并不可靠。
此外,一些雜志直接提出了內參和目的蛋白要在同一張印跡膜上,甚至直接提出最好選用總蛋白進行歸一化,如果使用看家蛋白,則需要提供看家蛋白表達穩定并且不受實驗條件影響的證據。

那么總蛋白歸一化到底是什么呢?又如何實現呢?
研究人員指出用總蛋白定量是一種可靠的定量方式。
總蛋白定量是以總蛋白(toal protein nomalization) 作為內參對目標蛋白表達量分析的技術。
·總蛋白比看家基因等內參的線性檢測范圍更寬
·在整個實驗和系統中更加穩定
·能有效排除實驗條件和體系對結果的影響
·更真實地反映目標蛋白表達量的變化
Azure300Q多功能分子成像系統增加了Q模塊-總蛋白歸一化通道,使用AzureRed做總蛋白歸一化,不需要看家蛋白的一抗和二抗,節省抗體的花費,只需30min染色,步驟更簡單,最后成像即可將化學發光的目的條帶和總蛋白的條帶在同一張膜上呈現,通過AzureSpot總蛋白分析模塊進行歸一化分析。

AzureRed和化學發光組合,可以同時呈現化學發光Western Blot以及全蛋白定量

AzureRed以及近紅外(NIR)染料組合,可以實現全蛋白歸一化多重熒光檢測
AzureSpot軟件全蛋白歸一化分析模塊
Azure300Q讓您的結果更符合期刊雜志的要求!