硬組織的病理觀測對于研究骨骼、牙齒等器官疾病的發(fā)展具有很重要的意義。但是硬組織由于其本身硬度大難以被傳統(tǒng)的薄片切割機(jī)直接切割，因此在切割之前往往需要脫鈣處理，使其軟化以達(dá)到刀片所能夠承受的硬度范圍內(nèi)進(jìn)行切割。但是鈣質(zhì)作為骨骼和牙齒的組成部分，進(jìn)行脫鈣將不可避免的丟失所研究器官中的信息，尤其是在含鈣量高的牙釉質(zhì)等部位中。同時(shí)，鈣在早期硬組織愈合如牙質(zhì)修復(fù)、骨創(chuàng)傷愈合等過程中也起著重要作用。另外脫鈣還不可避免的改變了硬組織的形貌，諸如厚度變化、褶皺、軟硬組織分離等問題。因此尋找無需脫鈣的切割方法對于研究硬組織研究是十分必要的。

雙光子切割具有如下優(yōu)勢：首先雙光子能夠穿透一定深度的樣品，因此能夠直接在物體內(nèi)部進(jìn)行切割，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對組織深層區(qū)域的切割；其次雙光子的聚焦點(diǎn)能夠精準(zhǔn)控制，可實(shí)現(xiàn)以往切割設(shè)備不能實(shí)現(xiàn)的3D切割；另外雙光子一般采用近紅外激光作為激發(fā)光源，這類激光往往擁有最佳穿深并且對于蛋白的吸收較低，基本不會(huì)灼傷樣品。最后雙光子切割相比于傳統(tǒng)打磨方法來說更為精準(zhǔn)，樣品的損失更少。
 

 

 

 

 
 

大鼠牙本質(zhì)切片觀測	人牙齒切片觀測