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客戶細胞培養過程中常見的問題說明【賽百慷】

瀏覽次數:3795 發布日期:2017-8-28  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

通過多次與客戶的了解和反饋,賽百慷的售后服務人員發現,客戶在收到經過專業包裝的細胞后,由于沒有經過系統專業的檢查和處理,就直接進行實驗,以致于后期容易產生了一系列問題。鑒于客戶對這一方面的知識有所欠缺薄弱,賽百慷的技術人員經過總結,對于在收到細胞怎樣專業處理做了以下說明:

一、問:細胞收到之后怎么處理?

答:常溫運輸的細胞

首先觀察包裝是否完好,瓶口是否漏液,然后顯微鏡先拍攝4x 、10x、 40x不同倍數下的照片各兩張。放入培養箱穩定兩小時后開始換液,貼壁細胞把培養基全部吸去,加入6ml新的完全培養基,懸浮細胞離心后,用6ml完全培養基重懸細胞。注意細胞的培養環境。

低溫運輸的細胞,通常是用干冰寄送。

客戶收到細胞后,觀察干冰是否揮發,細胞是否溶解。沒有問題可以直接放入液氮罐保存(長時間),或者超低溫冰箱(不超過一周)。

二、問:細胞凍存后,復蘇效果不好?

答:目前還有很多人采取4°、﹣20°各半小時再轉入-80°冰箱,這方法不好控制,有的細胞適合,有的細胞就達不到理想效果。現可采用程序降溫盒來凍存,降溫盒內添加的異丙醇可以達到每分鐘降一度的要求,操作也簡單。

凍存液采用90%血清+10%DMSO。部分低分化或干細胞可以添加馬血清凍存,另外可以先將凍存液配置成80%血清+20%DMSO,重懸細胞時用血清重懸,避免直接用DMSO對細胞吹打造成損傷。

三、問:細胞有黑點怎么回事?

答:這種情況可能性就比較多了,首先判斷黑點是在細胞表面,還是胞質內,還是在細胞外。細胞表面黑點增多可能是因為狀態變差,可能是培養條件不適合導致,或者細胞活性降低。細胞質內黑點增多,先確認是否是多核細胞。細胞外有黑點,黑點游動則可能是細菌污染,不游動但隨著培養時間增長黑點數量增多,應該檢測是不是支原體污染,懸浮細胞多數有黑點,可能是碎片,可低速離心去除。腺癌多數是分泌因子,看著黑點增多。

四、培養基,血清怎么選?

答:最好和細胞來源用的什么品牌使用相同的血清。基礎培養基進口和國產差別不大。專業的細胞公司使用的血清都是經過了大量細胞培養驗證的,不要輕易更換,目前國內血清品牌較多,質量不齊。

發布者:鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司
聯系電話:400-021-2021
E-mail:2766275720@qq.com

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